HiMedia M1663-100G HiCrome PA бульон

Микробиологический бульон HiMedia M1663-100G HiCrome PA с конечным pH 7,0 ± 0,2 предназначен для выявления бактерий группы кишечной палочки в воде. Среда применяется для качественного определения присутствия или отсутствия колиформных бактерий, включая флуорогенное выявление Escherichia coli, и не подлежит автоклавированию.

Назначение

HiCrome PA Broth предназначен для обнаружения присутствия или отсутствия бактерий группы кишечной палочки в образцах воды. Среда используется в микробиологических лабораториях, в том числе при контроле безопасности воды и в пищевой микробиологии.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Исследование воды на наличие маркерных групп, таких как колиформные бактерии, относится к распространённым методам контроля в лабораториях пищевой микробиологии благодаря относительной простоте и скорости выполнения. Если заявлено, что вода прошла обработку для обеспечения безопасности, обнаружение таких микроорганизмов свидетельствует о недостаточной эффективности процесса обработки.

HiCrome PA Broth представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной Hajna и Perry, и применяется для выявления присутствия или отсутствия колиформных бактерий в воде.

Флуорогенное соединение 4-метилумбеллиферил β-D-глюкуронид (MUG) введено в состав среды для флуорогенного обнаружения Escherichia coli — основного индикаторного микроорганизма фекального загрязнения воды. Фермент β-глюкуронидаза, присутствующий у Escherichia coli, гидролизует MUG с образованием флуоресцирующего конечного продукта 4-метилумбеллиферона. Продукт выявляют при наблюдении флуоресценции среды под ультрафиолетовым светом с длиной волны 366 нм.

MUG также позволяет выявлять анаэрогенные штаммы, которые могут не определяться стандартной процедурой.

Тест с ONPG используют для определения присутствия или отсутствия β-галактозидазы у микроорганизмов. Тест важен для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, которые обычно классифицируют по способности ферментировать лактозу. ONPG имеет структуру, сходную со структурой лактозы.

Для выявления ферментации лактозы необходимо присутствие двух ферментов: пермеазы и β-D-галактозидазы. Истинные неферментирующие лактозу микроорганизмы не имеют ни одного из этих ферментов. Микроорганизмы с поздней ферментацией лактозы не имеют пермеазы, но обладают β-галактозидазой. При наличии β-галактозидазы бесцветный ONPG расщепляется на галактозу и о-нитрофенол — жёлтое соединение.

Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает среду необходимыми питательными веществами. Лактоза является ферментируемым углеводом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Сильная буферная система контролирует pH при ферментативных процессах. Желчные соли подавляют грамположительные бактерии, особенно виды Bacillus и фекальные стрептококки.

В большинстве случаев активность β-глюкуронидазы проявляется в течение 4 ч, однако некоторые слабоположительные по β-глюкуронидазе штаммы требуют инкубации в течение ночи.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 37,35 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите приготовленную среду до 50 °C.
5. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция: реакция 3,7%-ного водного раствора при 25 °C; pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики для среды M1663 определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухого порошка: при 2–8 °C.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Указание при получении: хранить при 15–25 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое отличие методики

В составе среды одновременно применяются ONPG для определения β-галактозидазной активности и MUG для флуорогенного выявления β-глюкуронидазной активности, что позволяет различать реакции микроорганизмов по жёлтой окраске и флуоресценции при 366 нм.