Питательная микробиологическая среда Бульон Мюллера-Хинтона № 2 HiMedia M1657-500G (уп/500 гр) производства HiMedia с низким содержанием тимина и тимидина и контролируемыми концентрациями ионов кальция и магния. Бульон применяется для количественного определения чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, выделенных из клинических образцов, и не рекомендован для требовательных микроорганизмов.

Назначение

Бульон Мюллера—Хинтона № 2 с контролем катионов используют в количественных процедурах определения чувствительности к противомикробным препаратам быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, выделенных из клинических образцов.

Тип образца: чистые культуры, выделенные из мочи, кала и других клинических образцов.

Среда разработана с низким содержанием тимина и тимидина; концентрации ионов кальция и магния скорректированы в соответствии с рекомендациями CLSI. Среда не рекомендуется для требовательных микроорганизмов.

Состав

Состав, г/л:

Итоговая формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Эквивалент мясного экстракта.

$ Эквивалент кислотного гидролизата казеина.

Итоговое значение pH при 25 °C: 7,3 ± 0,1.

Принцип действия и интерпретация

Исходная формула Мюллера—Хинтона была разработана как простая прозрачная агаровая среда для культивирования патогенных Neisseria. После появления других питательных сред агар Мюллера—Хинтона перестали использовать для культивирования патогенных Neisseria, однако среда получила широкое применение при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфонамидам. В настоящее время среда применяется для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам.

Пептон HM B и Acicase™ обеспечивают поступление азотсодержащих соединений, углерода, серы и других необходимых питательных веществ. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде. При гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии.

Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина; это оценивают по значениям минимальной подавляющей концентрации для Enterococcus faecalis при применении комбинации сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

Тимин и тимидин подавляют активность сульфонамидов и триметоприма. Ионы кальция и магния влияют на активность аминогликозидных антибиотиков.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 22,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду. Не допускайте перегрева.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 116–121 °C в течение 10 мин.
5. Не перегревайте среду.

Давление при стерилизации: соответствует 10–15 фунтам давления, ориентировочно ≈0,069–0,103 МПа.

При необходимости в среду добавляют соли или корректируют их содержание для обеспечения требуемых концентраций кальция и магния в мг/л, а также для соответствия установленным параметрам эффективности.

Методика определения чувствительности

1. Противомикробные препараты подготавливают в виде последовательных двукратных разведений.
2. В каждое разведение вносят исследуемую культуру так, чтобы конечная концентрация посевного материала составляла 5×10⁵ КОЕ/мл.
3. Инкубируют при 35 °C.
4. Наличие помутнения указывает на рост микроорганизма.
5. Минимальная концентрация противомикробного препарата, при которой рост отсутствует, является минимальной подавляющей концентрацией (МПК) для данного микроорганизма и препарата.
6. Чувствительность, промежуточную чувствительность или устойчивость микроорганизма определяют сравнением полученной МПК с интерпретационными стандартами МПК, приведёнными в стандарте CLSI M7.

На результаты тестов чувствительности методом разведения в бульоне могут влиять:

• питательная среда;
• активность противомикробного препарата;
• концентрация посевного материала;
• pH;
• стабильность противомикробного препарата;
• механизмы устойчивости исследуемого микроорганизма.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Назначение изделия: бульон.
Фасовка: 500 г.
Идентификатор изделия: M1657-500G.
Сертификат: ФСЗ 2009/03707.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,2 % масс./об. при 25 °C.

pH по требованиям контроля качества: 7,20–7,40.

pH приготовленной среды при 25 °C: 7,3 ± 0,1.

Содержание катионов:

• кальций: 20–25 мг/л;
• магний: 10–12,5 мг/л.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Среда рекомендована только для определения чувствительности чистых культур.
2. Плотность посевного материала может влиять на размер зоны задержки роста: слишком высокая концентрация посевного материала может привести к уменьшению зон, а слишком низкая — к их увеличению.
3. Требовательные микроорганизмы могут не расти на этой среде; для их культивирования может потребоваться добавление крови.
4. Требовательные анаэробные микроорганизмы могут не расти на этой среде.
5. При определении чувствительности с использованием дисков с антибиотиком необходимо соблюдать надлежащие условия хранения дисков, поскольку хранение может повлиять на активность антибиотика.
6. В отдельных случаях результаты определения чувствительности in vitro могут не соответствовать результатам действия препарата in vivo.

Условия хранения и срок годности

Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывать ёмкость.

Для сохранения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в течение указанного срока годности.

Требования безопасности

Только для диагностики in vitro. Только для профессионального применения.

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками и установленными процедурами обращения с инфекционными материалами.

Сравнительный технический контекст

В отличие от стандартных вариантов бульона Мюллера—