Сухая питательная среда Бульон Мюллера-Хинтона № 2 HiMedia M1657-500G (уп/500 г) производства HiMedia для количественного определения чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий. Применяется для анализа клинических образцов; состав оптимизирован по концентрации ионов кальция и магния в соответствии с рекомендациями CLSI.

Принцип измерения

Бульон Мюллера-Хинтона № 2 с контролем катионов предназначен для тестирования чувствительности микроорганизмов к антимикробным агентам. Среда характеризуется низким содержанием тимина и тимидина, так как избыток этих веществ ингибирует активность сульфаниламидов и триметоприма. Концентрация ионов кальция и магния строго отрегулирована, поскольку они могут влиять на активность аминогликозидных антибиотиков.

Компоненты среды:

• Пептон HM B и Acicase™: обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие необходимые питательные вещества.
• Крахмал: выполняет роль защитного коллоида против токсических веществ, присутствующих в среде; при гидролизе дает декстрозу, служащую источником энергии.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

В качестве образцов используются клинические пробы: чистые культуры, выделенные из мочи, кала и других биоматериалов.

Процедура тестирования

1. Антимикробные агенты готовят в виде последовательных двукратных разведений.
2. В среду вносят тестовую культуру для достижения конечной концентрации 5×10⁵ КОЕ/мл.
3. Образцы инкубируют при температуре 35 °C.
4. Появление помутнения в бульоне свидетельствует о росте микроорганизма.
5. Минимальная концентрация антимикробного агента, при которой рост отсутствует, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК) для данного организма.
6. Интерпретация результатов (чувствительный, промежуточный или резистентный статус) проводится путем сравнения полученной МПК со стандартами CLSI M7.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 22,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения среды.
3. Разлить по пробиркам или колбам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 116–121 °C в течение 10 минут (давление ≈0,07–0,1 МПа). Важно: не перегревать среду. Примечание: при необходимости среда дополняется солями для обеспечения требуемой концентрации ионов кальция и магния (мг/л).

Технические характеристики

Состав, г/л:

Эквивалент мясного экстракта

$ Эквивалент кислотного гидролизата казеина

Физико-химические показатели:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,1
• Диапазон pH: 7,20–7,40
• Уровень катионов кальция: 20–25 мг/л
• Уровень катионов магния: 10–12,5 мг/л
• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Среда рекомендуется только для тестирования чувствительности чистых культур.
• Плотность посевной дозы может влиять на размер зон: избыточный инокулят может привести к уменьшению зон, недостаточный — к их увеличению.
• Требовательные (fastidious) организмы могут не расти на данной среде и требовать добавления крови.
• Требовательные анаэробы могут не расти на данной среде.
• Результаты in vitro могут не всегда совпадать с результатами in vivo.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть подвергнуты безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
• Назначение: только для диагностики in vitro, только для профессионального использования.
• Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.