Питательная микробиологическая среда HiMedia M1657-100G Бульон Мюллера-Хинтона №2 для контроля производства HiMedia — порошковая среда с низким содержанием тимина и тимидина, скорректированными концентрациями ионов кальция и магния и конечным pH 7,3 ± 0,1. Применяется для количественного определения чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий клинического происхождения; среда не предназначена для требовательных микроорганизмов и облигатно-анаэробных бактерий.

Назначение

Бульон Мюллера—Хинтона № 2 с контролем катионов применяют в количественных процедурах определения чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, выделенных из клинических образцов.

Тип образца: чистые культуры, выделенные из мочи, кала и других клинических образцов.

Среда разработана для получения низкого содержания тимина и тимидина, а также концентраций ионов кальция и магния, скорректированных в соответствии с рекомендациями CLSI. Продукт предназначен только для диагностического применения in vitro и профессионального использования.

Принцип действия и интерпретация

Формула Мюллера—Хинтона первоначально была разработана как простая прозрачная агаризованная среда для культивирования патогенных видов рода Neisseria. После появления других сред агар Мюллера—Хинтона перестали использовать для культивирования патогенных Neisseria, однако среда получила широкое применение при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфонамидам. В настоящее время среду используют для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам.

Бульон Мюллера—Хинтона № 2 с контролем катионов используют при исследовании чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий из клинических образцов. Низкое содержание тимина и тимидина, а также регулируемая концентрация ионов кальция и магния обеспечивают соответствие параметрам, необходимым для процедур определения чувствительности.

• Тимин и тимидин ингибируют активность сульфонамидов и триметоприма.
• Ионы кальция и магния могут влиять на активность антибиотиков-аминогликозидов.
• Среда не рекомендуется для требовательных микроорганизмов.
• Пептон HM и Acicase™ обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие необходимые питательные вещества.
• Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде.
• При гидролизе крахмала образуется декстроза, которая служит источником энергии.
• Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина, что определено по значениям минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для Enterococcus faecalis при использовании комбинации сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

Отличительная особенность этой формулы по сравнению с исходным бульоном Мюллера—Хинтона — контроль содержания тимина и тимидина и корректировка концентраций кальция и магния для процедур определения чувствительности.

Состав

Состав приведён из расчёта на 1 л среды.

Примечания:

• Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

• Эквивалент мясного экстракта.

• $ Эквивалент кислотного гидролизата казеина.

Приготовление среды

1. Взвесьте 22,0 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 116–121 °C в течение 10 мин. Не перегревайте среду.

Температурный режим 116–121 °C соответствует давлению 10–15 фунтов, ориентировочно 0,069–0,103 МПа.

Среду корректируют и/или дополнительно обогащают солями для обеспечения требуемых концентраций кальция и магния в мг/л, а также при необходимости для соответствия рабочим параметрам.

Методика определения чувствительности

В бульоне Мюллера—Хинтона № 2 с контролем катионов противомикробные препараты готовят в последовательных двукратных разведениях. Разведения инокулируют исследуемой культурой до конечной концентрации 5×10⁵ КОЕ/мл.

После инкубации при 35 °C наличие помутнения указывает на рост микроорганизма. Наименьшая концентрация противомикробного препарата, при которой рост отсутствует, является минимальной ингибирующей концентрацией (МИК) для данного микроорганизма и препарата.

Для определения чувствительности, промежуточной чувствительности или устойчивости микроорганизма результат сравнивают с интерпретационными стандартами МИК, приведёнными в стандарте CLSI M7.

На результаты теста чувствительности методом разведения в бульоне могут влиять:

• состав питательной среды;
• активность противомикробного препарата;
• концентрация посевного материала;
• pH;
• стабильность противомикробного препарата;
• механизмы устойчивости исследуемых микроорганизмов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Основные параметры

• Назначение изделия: бульон
• Масса: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: ПНД (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,1
• Диапазон pH: 7,20–7,40

Контроль катионов

• Кальций: 20–25 мг/л
• Магний: 10–12,5 мг/л

Параметры приготовленной среды

• Внешний вид сухого продукта: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,2 % масс./об. при 25 °C
• pH приготовленной среды: 7,3 ± 0,1

Таблица характеристик продукта

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.