HiMedia M1643-100G Модифицированный лаурилсульфатный триптозный бульон

Питательная среда HiMedia M1643-100G Модифицированный лаурилсульфатный триптозный бульон представляет собой порошковую основу для предварительного обогащения проб на Cronobacter sakazakii. Среда применяется для анализа молока и молочных продуктов; селективность обеспечивается добавлением ванкомицина и ингибированием микроорганизмов, отличных от колиформных бактерий.

Назначение

Модифицированный лаурилсульфатный триптозный бульон используется как среда предварительного обогащения для выявления Cronobacter sakazakii в молоке и молочных продуктах.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Технические характеристики

Приготовление среды

1. Суспендируйте 64,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Стерилизуйте в автоклаве при давлении ≈0,103 МПа (15 psi) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
3. Охладите среду до 50 °C.
4. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое флакона с добавкой ванкомицина FD233.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду по пробиркам.

Принцип действия и интерпретация

Виды рода Enterobacter широко распространены в природе и встречаются в пресной воде, почве, сточных водах, растениях, овощах, фекалиях животных и человека.

Cronobacter sakazakii — грамотрицательная палочковидная бактерия, тесно связанная с неонатальным менингитом и сепсисом. Модифицированный лаурилсульфатный триптозный бульон применяется для предварительного обогащения проб на Cronobacter sakazakii; методика соответствует требованиям ISO/TS 22964.

Функции компонентов среды:

• ферментативный перевар тканей животного и растительного происхождения обеспечивает необходимые питательные вещества, включая азотистые и углеродсодержащие соединения;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• фосфаты калия формируют буферную систему;
• лаурилсульфат натрия подавляет рост микроорганизмов, отличных от колиформных бактерий.

Методика выявления Cronobacter sakazakii

1. Внесите 1 г исследуемой пробы в 9 мл буферной пептонной воды M1494I.
2. Инкубируйте пробу при 37 °C в течение 18 ч.
3. После инкубации внесите 0,1 мл полученной суспензии в модифицированный лаурилсульфатный триптозный бульон M1643 для селективного обогащения Cronobacter sakazakii.
4. Инкубируйте среду при 44 °C в течение 24 ч.
5. Петлёй выполните штриховой посев на хромогенный агар для Enterobacter sakazakii, модифицированный, HiCrome Enterobacter Sakazakii Agar, Modified M1641.
6. Инкубируйте чашки при 44 °C в течение 24 ч.
7. Проведите наблюдение типичных колоний Cronobacter sakazakii.
8. Подтвердите принадлежность выявленных колоний биохимическими методами.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 6,46 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 6,60–7,00.
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют для среды с добавленной добавкой ванкомицина FD233 после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

Cronobacter sakazakii ранее классифицировался как Enterobacter sakazakii.

Условия хранения

• Сухую среду хранить в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Техническое соответствие методики

Методика предварительного обогащения Cronobacter sakazakii основана на требованиях ISO/TS 22964; стандарт приведён как часть описания метода, а не как характеристика прослеживаемости или сертификации продукта.