HiMedia M1533I-500G Жидкий селенит-цистиновый бульон (Twin Pack)

Порошковая питательная среда HiMedia M1533I-500G Жидкий селенит-цистиновый бульон (Twin Pack) производства HiMedia предназначена для обогащения проб и поставляется в упаковке массой 500 г. Среда применяется для выделения Salmonellae из пищевых и клинических образцов, при этом приготовленный бульон нельзя автоклавировать.

Назначение

Жидкий селенит-цистиновый бульон применяется как селективная среда обогащения для выделения Salmonellae из пищевых продуктов и клинических образцов, включая фекалии, мочу и другие патологические материалы. Состав и критерии эффективности соответствуют ISO 6579-1:2017.

Среда полезна для обнаружения Salmonella при неострых стадиях заболевания, когда количество микроорганизмов в фекалиях невелико, а также для эпидемиологических исследований и повышения вероятности выявления малых количеств микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период реконвалесценции.

Состав

Состав по ISO 6579-1:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Масса: 500 г

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита обусловлено подавлением сопутствующей микрофлоры, что позволяет обогащать культуру Salmonella. Жидкая селенит-цистиновая среда представляет собой модификацию формулы Лейфсона с добавлением цистина.

• Триптон обеспечивает азотистые питательные вещества.
• Лактоза поддерживает pH среды: при восстановлении селенита в процессе роста бактерий образуется щёлочь, а повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к чрезмерному росту других бактерий.
• Кислота, образующаяся при ферментации лактозы, поддерживает нейтральный pH.
• Фосфат стабилизирует pH и одновременно снижает токсичность селенита.
• L-цистин улучшает восстановление Salmonellae.

После обогащения бульон пересевают на твёрдую питательную среду для последующего выделения микроорганизмов.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 4,0 г части B в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 12,97 г части A — количество обезвоженной среды, эквивалентное одной порции на литр.
3. Нагрейте до полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду в стерильные пробирки.
5. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке текучего пара в течение 10 мин.
6. Не автоклавируйте среду. Чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
7. Приготовленную среду следует выбросить, если произошло значительное восстановление селенита, на что указывает красный осадок на дне пробирки или флакона.

Методика работы с образцами

Тип образца

Пищевые образцы.

Сбор и подготовка образцов

Процедура обработки выполняется в соответствии с описанной последовательностью:

1. Предварительное обогащение. 25 г образца внесите в 225 мл буферной пептонной воды M1494I. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 16–20 ч.
2. Селективное обогащение. Внесите 10 мл предварительно обогащённого образца в жидкий селенит-цистиновый бульон Twin Pack M1533I. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 24 ч.
3. Выделение. Полученную культуру высейте на агар с бриллиантовым зелёным и фосфатом M971S. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 24 ч.
4. Подтверждение. Для подтверждения выполняют биохимические и серологические исследования.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: от почти белого до светло-жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет: светло-жёлтый.

Прозрачность: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

Реакция среды

Реакция раствора, приготовленного из 1,3 % масс./об. части A и 0,4 % масс./об. части B, при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,80–7,20

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на агар МакКонки M081.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения невскрытого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения невскрытого продукта: плотно закрытая упаковка.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте упаковку.
• Эффективность продукта сохраняется при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте среду: чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
2. Не инкубируйте бульон более 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Требования безопасности

Гидроселенит натрия, также называемый биселенитом натрия, является высокотоксичным и коррозионно-активным веществом, обладающим тератогенным действием. При работе с компонентами необходимо соблюдать осторожность.

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими руководствами