HiMedia M148I-500G Ацетамидный бульон (Twin Pack)

Питательная среда HiMedia M148I-500G Ацетамидный бульон (Twin Pack) — химически определённая порошкообразная среда для микробиологического анализа. Ацетамидный бульон применяют для подтверждения неферментирующих грамотрицательных бактерий, особенно Pseudomonas aeruginosa, при температуре хранения ниже 30 °C.

Назначение

Ацетамидный бульон предназначен для подтверждения неферментирующих грамотрицательных бактерий, в частности Pseudomonas aeruginosa.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,5
• Происхождение: химически определённая среда HiCynth™
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Фасовка: 500 г
• Формат: Twin Pack, две части среды — часть A и часть B

Приготовление среды

1. Суспендируйте 1,4 г части B в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г части A.
3. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
4. Разлейте среду по пробиркам или в другую подходящую лабораторную посуду.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

Различные патогенные микроорганизмы могут передаваться человеку через природные пресные и морские рекреационные воды, загрязнённые сточными водами. Pseudomonas aeruginosa относится к микроорганизмам, способным расти в воде при очень низкой концентрации питательных веществ.

Основными индикаторами качества воды являются Escherichia coli и Enterococci. Определение количества Pseudomonas aeruginosa в рекреационных водах может быть полезно при сбросе в водоёмы отходов целлюлозно-бумажного производства и стоков предприятий текстильной отделки.

Одно из характерных свойств Pseudomonas aeruginosa — способность образовывать аммиак из ацетамида. Ацетамидный бульон, приготовленный по проекту prEN 12780:1999, применяют для подтверждения наличия неферментирующих грамотрицательных Pseudomonas aeruginosa.

Микроорганизмы, растущие в этой среде, метаболизируют ацетамид посредством дезаминирования, связанного с активностью акриламидaзы. Такая способность характерна для Ps. aeruginosa, Ps. acidovorans группы III (Achromobacter xylosoxidans) и Alcaligens odorans.

• Ацетамид служит единственным источником азота и углерода.
• Сульфат магния, молибдат натрия и сульфат железа являются источниками ионов, стимулирующих метаболизм.
• Фосфат выполняет функцию буферного компонента.

Методика подтверждения Pseudomonas aeruginosa в пробах воды

1. Профильтруйте исследуемые пробы воды через стерильные мембранные фильтры из эфира целлюлозы.
2. Асептически поместите фильтры на основу агара для Pseudomonas (M085), содержащую добавку Cetrinix (FD029).
3. Инкубируйте чашки с фильтрами при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
4. Подсчитайте колонии, продуцирующие пиоцианин, как подтверждённые Ps. aeruginosa.
5. Непродуцирующие пиоцианин флуоресцентные колонии учитывайте как предположительные Ps. aeruginosa.
6. Подтвердите предположительные колонии Ps. aeruginosa с использованием ацетамидного бульона M148I.
7. Для выявления образования аммиака из ацетамида добавьте реактив Несслера (R010).

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: бесцветные гигроскопичные кристаллы.
• Часть B: от почти белого до белого цвета, однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Бесцветный прозрачный раствор.

Реакция среды

Реакция полной среды, приготовленной из смеси 0,2 % масс./об. части A и 0,14 % масс./об. части B, при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,5

Диапазон pH

• pH: 6,50–7,50

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой упаковке.
• Температурный диапазон, указанный в карточке товара: 10–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Техническое отличие

В отличие от готовых питательных сред, продукт поставляется в виде двух отдельных компонентов: часть A содержит ацетамид, а часть B — минеральные соли, буферный компонент и соли, стимулирующие метаболизм.

Технические характеристики

Совместимые реагенты и среды

• Основа агара для Pseudomonas M085.
• Добавка Cetrinix FD029.
• Реактив Несслера R010.