HiMedia M148I-500G Ацетамидный бульон (Twin Pack)

Ацетамидный бульон HiMedia M148I-500G (Twin Pack) предназначен для подтверждения неферментирующих грамотрицательных бактерий, в частности Pseudomonas aeruginosa. Среда используется для выявления способности микроорганизмов вырабатывать аммиак из ацетамида; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Ацетамидный бульон рекомендуется для подтверждения наличия неферментирующих грамотрицательных бактерий Pseudomonas aeruginosa. Среда применяется при анализе рекреационных пресных и морских вод, загрязненных сточными водами, особенно в случаях сброса отходов целлюлозно-бумажных и текстильных предприятий.

Принцип измерения

Определение основано на способности Ps. aeruginosa и некоторых других микроорганизмов (например, Ps. acidovorans группы III (Achromobacter xylosoxidans) и Alcaligens odorans) метаболизировать ацетамид посредством дезаминирования (активность акриламидазы). В данной среде ацетамид служит единственным источником азота и углерода. Сульфат магния, молибдат натрия и сульфат железа стимулируют метаболизм, а фосфат выполняет роль буферного агента.

Продуцирование аммиака из ацетамида обнаруживается путем добавления реактива Несслера (R010).

Методика проведения анализа

1. Образцы воды фильтруют через стерильные мембранные фильтры из целлюлозного эфира.
2. Фильтры асептически помещают на базовый агар для псевдомонас (Pseudomonas Agar Base M085) с добавлением добавки Cetrinix (FD029).
3. Пластины с фильтрами инкубируют при 35–37 °C в течение 24–48 часов.
4. Колонии, продуцирующие пиоцианин, считаются подтвержденными Ps. aeruginosa. Флуоресцентные колонии, не продуцирующие пиоцианин, считаются предполагаемыми Ps. aeruginosa.
5. Предполагаемые колонии Ps. aeruginosa подтверждают с помощью ацетамидного бульона (M148I).

Приготовление среды

1. Растворить 1,4 г компонента B в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавить 2 г компонента A.
3. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
4. Разлить по пробиркам или иным емкостям.
5. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,5.

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид:
  • Часть A: бесцветные гигроскопичные кристаллы.
  • Часть B: однородный свободнотекущий порошок от белого до почти белого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный раствор.
• Реакция: pH готовой среды (смесь 0,2 % мас./об. части A и 0,14 % мас./об. части B) при 25 °C составляет 7,0 ± 0,5.
• Диапазон pH: 6,50–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.