HiMedia M148I-100G Ацетамидный бульон (Twin Pack)

Питательная среда ацетамидный бульон HiMedia M148I-100G (Twin Pack) предназначена для подтверждения неферментирующих грамотрицательных бактерий, в частности Pseudomonas aeruginosa. Среда используется для выявления способности микроорганизмов вырабатывать аммиак из ацетамида; вес упаковки составляет 100 г.

Область применения

Ацетамидный бульон рекомендуется для подтверждения наличия Pseudomonas aeruginosa в пробах рекреационных пресных и морских вод, которые могут быть загрязнены сточными водами. Определение данного микроорганизма особенно актуально при мониторинге вод, принимающих стоки целлюлозно-бумажных и текстильных предприятий.

Принцип измерения

В основе метода лежит способность P. aeruginosa метаболизировать ацетамид посредством дезаминирования (активность акриламидазы), в результате чего из ацетамида вырабатывается аммиак. Ацетамид в составе среды служит единственным источником азота и углерода. Сульфат магния, молибдат натрия и сульфат железа стимулируют метаболизм, а фосфат выполняет роль буферного агента.

Подтверждение наличия Ps. aeruginosa проводится следующим образом:

1. Пробы воды фильтруют через стерильные мембранные фильтры из целлюлозного эфира.
2. Фильтры асептически помещают на базовый агар для псевдомонас (Pseudomonas Agar Base M085) с добавлением добавки Cetrinix (FD029).
3. Пластины инкубируют при 35–37 °C в течение 24–48 часов.
4. Колонии, вырабатывающие пиоцианин, считаются подтвержденными Ps. aeruginosa. Флуоресцентные колонии, не вырабатывающие пиоцианин, считаются предполагаемыми Ps. aeruginosa.
5. Предполагаемые колонии подтверждают с помощью ацетамидного бульона (M148I).
6. Образование аммиака из ацетамида детектируют путем добавления реактива Несслера (R010).

Состав

Состав, г/л:

Значение pH конечного раствора (при 25 °C): 7,0 ± 0,5.

Методика приготовления

1. Растворите 1,4 г компонента части B в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 2 г компонента части A.
3. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения среды.
4. Разлейте по пробиркам или иным подходящим емкостям.
5. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Контроль качества

• Внешний вид:
  • Часть A: бесцветные гигроскопичные кристаллы.
  • Часть B: гомогенный свободнотекучий порошок от белого до почти белого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: бесцветный прозрачный раствор.
• Реакция: pH готовой среды (смесь 0,2 % мас./об. части A и 0,14 % мас./об. части B) при 25 °C составляет 7,0 ± 0,5.
• Диапазон pH: 6,50–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.