Бульон с ацетамидом HiMedia M148-500G (уп/500 гр)

Специальная питательная среда Бульон с ацетамидом HiMedia M148-500G (уп/500 гр) с химически определённым составом предназначена для микробиологического анализа воды. Бульон используют для подтверждения наличия Pseudomonas aeruginosa, при этом положительная реакция наблюдается только примерно у 40 % апиоцианогенных штаммов.

Назначение

Бульон с ацетамидом применяют для подтверждения Pseudomonas aeruginosa в пробах воды. Тип питательной среды — специальный; назначение изделия — бульон. Сертификат: ФСЗ 2009/03705.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 7,63 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10,0 г части A.
3. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
4. Разлейте среду по 10 мл в пробирки либо в объёме, необходимом для конкретной методики.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.

Принцип действия и интерпретация

Бульон с ацетамидом сформулирован в соответствии с рекомендациями стандартных методов исследования воды и сточных вод. Ацетамид используется широким рядом нефертментирующих микроорганизмов. Среда содержит неорганические соли, а ацетамид служит единственным источником углерода и азота.

Лишь небольшое количество микроорганизмов, растущих на этой среде, метаболизирует ацетамид посредством деаминирования, связанного с акриламидaзной активностью. Такая способность используется для идентификации различных неферментирующих грамотрицательных микроорганизмов. Деаминирование ацетамида характерно для:

• Pseudomonas aeruginosa;
• группы III Pseudomonas aciovorans (Achromobacter xylosoxidans);
• Alcaligenes odorans.

В результате деаминирования ацетамида высвобождается аммиак, который повышает pH среды. Это вызывает изменение окраски индикатора фенолового красного с жёлто-оранжевой на пурпурно-красную.

Некоторым штаммам требуется до 7 суток для проявления положительной реакции, поскольку деаминирование акриламида происходит медленно. Положительную реакцию демонстрируют только около 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa, поэтому результат анализа не следует использовать как единственный критерий идентификации.

Функции компонентов среды:

• фосфаты: буферные агенты;
• сульфат магния: источник ионов, стимулирующих метаболизм;
• ацетамид: единственный источник азота и углерода;
• хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие;
• феноловый красный: индикатор pH.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Тип образца: пробы воды.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применяемыми руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Только около 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa демонстрируют положительную реакцию. Поэтому результат данного теста не рекомендуется использовать как единственный критерий идентификации.
2. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные картины роста на среде.
3. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При необходимости выявления конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом собственных требований.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: бесцветные гигроскопичные кристаллы.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках приготовленная среда представляет собой прозрачный раствор оранжевого цвета.

Реакция среды

Реакция среды для смеси, содержащей 1 % (м/об) части A и 0,76 % (м/об) части B, при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2;
• диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–7 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Форма выпуска: двойная упаковка.
• Масса упаковки: 500 г.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.