HiMedia M148-100G Ацетамидный бульон (Twin Pack)

Питательная среда ацетамидный бульон HiMedia M148-100G (Twin Pack) предназначена для подтверждения наличия Pseudomonas aeruginosa в пробах воды. Среда основана на способности специфических неферментирующих микроорганизмов метаболизировать ацетамид; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Ацетамидный бульон разработан в соответствии с рекомендациями «Стандартных методов исследования воды и сточных вод» (Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater). Ацетамид служит единственным источником углерода и азота. Лишь ограниченное число микроорганизмов способны метаболизировать ацетамид посредством процесса дезаминирования (акриламидазная активность). Эта уникальная способность используется для идентификации различных неферментирующих грамотрицательных организмов, таких как Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas aciovorans Group III (Achromobacter xylosoxidans) и Alcaligenes odorans.

Дезаминирование ацетамида приводит к высвобождению аммиака, что повышает pH среды. Это вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного с желто-оранжевого на пурпурно-красный.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворите 7,63 г компонента B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10,0 г компонента A.
3. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
4. Разлейте среду в пробирки по 10 мл или в другом необходимом объеме.
5. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
6. Охладите до 45–50 °C.

Процедура и интерпретация

Посев производится в подготовленную среду. Некоторые штаммы требуют до семи дней для проявления положительной реакции из-за медленного дезаминирования акриламида.

Интерпретация результатов:

• Положительная реакция: изменение цвета среды на пурпурно-красный (индикация повышения pH).
• Отрицательная реакция: отсутствие изменения цвета.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Область применения

Среда используется для анализа проб воды. Сбор и обработка проб должны осуществляться в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

Контроль качества

• Внешний вид:
  • Часть A: бесцветные деликвесцентные (расплывающиеся) кристаллы.
  • Часть B: светло-желтый или светло-розовый однородный свободнотекучий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор оранжевого цвета.
• Реакция: pH 7,0 $\pm$ 0,2 при 25 °C (смесь 1 % масс./об. части A и 0,76 % масс./об. части B).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 4–7 дней.

Ограничения применения

1. Только около 40 % апиоцианогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa дают положительную реакцию. Данный тест не рекомендуется использовать как единственный критерий идентификации.
2. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
3. Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица) и соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед окончательной утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.