HiMedia M1453A-500G Быстрый HiColiform бульон с триптофаном

Сухая питательная среда HiMedia M1453A-500G «Быстрый HiColiform бульон с триптофаном» для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды и пищевых продуктов. Использует комбинацию хромогенных и флуорогенных субстратов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда Rapid HiColiform™ Broth w/Tryptophan является модификацией бульона LMX. Обнаружение микроорганизмов основано на действии специфических ферментов:

• Флуорогенный субстрат 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG) расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, которая специфически присутствует у Escherichia coli. Реакция проявляется в виде синего флуоресцентного свечения при облучении ультрафиолетом (УФ).
• Хромогенный субстрат 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид расщепляется общими колиформами, что приводит к появлению сине-зеленого окрашивания среды.
• IPTG (1-изопропил-β-D-1-тио-галактопиранозид) усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.
• L-триптофан добавлен для улучшения интенсивности индольной реакции.

Для подтверждения наличия E. coli на поверхность среды наносят реактив Ковача: при положительной реакции слой окрашивается в красный цвет в течение 2 минут.

Функции компонентов:

• Триптоза: источник углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Сорбитол: ферментируемый углевод.
• Фосфатные соли: обеспечивают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): селективный агент, подавляющий рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2.

Методика приготовления и применения

Приготовление среды

1. Суспендировать 17,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации использовать 34,06 г порошка на 1000 мл воды.
3. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
4. Разлить по пробиркам или колбам.
5. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.

Работа с образцами

• Пищевые продукты: сбор и обработка проб проводятся согласно соответствующим руководствам.
• Вода: сбор и обработка проб проводятся согласно местным стандартам и руководствам.
• После использования все контаминированные материалы подлежат обязательному автоклавированию перед утилизацией.

Технические характеристики

Дополнительные параметры:

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор (в пробирках возможен небольшой осадок).
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения применения

1. Около 97 % штаммов E. coli являются β-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут не проявлять флуоресценции.
2. Для окончательного подтверждения результатов требуется проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.