Питательная микробиологическая среда HiMedia M1453A-500G Быстрый HiColiform бульон с триптофаном производства HiMedia — порошковый бульон для выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий. Среда предназначена для анализа проб воды и пищевых продуктов с использованием хромогенного и флуорогенного субстратов; масса упаковки составляет 500 г.

Назначение

Среда предназначена для выявления и подтверждения наличия Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов с использованием комбинации хромогенных и флуорогенных субстратов.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2

Приготовление среды

1. Суспендируйте 17,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации растворите 34,06 г M1453A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип измерения и интерпретация

Быстрый HiColiform бульон с триптофаном представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Среда используется для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основании реакций с хромогенным и флуорогенным субстратами.

Флуорогенный субстрат 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG) расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, специфично присутствующим у Escherichia coli. Положительная реакция проявляется возникновением синей флуоресценции при освещении ультрафиолетом.

Присутствие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию среды, возникающему в результате расщепления хромогенного субстрата 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозида. 1-изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид (IPTG) усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E. coli поверхность среды покрывают реактивом Ковача. При положительной реакции слой реактива окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Функции компонентов среды:

• Триптоза служит источником углеродсодержащих и азотсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ для роста.
• Сорбитол является сбраживаемым углеводом.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.
• L-триптофан способствует улучшению индольной реакции.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. β-D-глюкуронидаза выявляется у 97 % штаммов E. coli, однако у некоторых штаммов флуоресценция может отсутствовать.
2. Для подтверждения результата необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета с небольшим осадком в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,70 % масс./об. при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1453A-500G
• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• После вскрытия контейнер необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии.
• Порошок гигроскопичен; попадание влаги может привести к образованию комков.
• После каждого использования контейнер следует герметично закрывать.
• Применяйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.