Питательная микробиологическая среда — бульон для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1453-500G (уп/500 гр) с конечным pH 6,8 ± 0,2. Применяется для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктах; для окончательного подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

HiMedia M1453-500G — элективный бульон для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий на основании фермент-субстратной реакции с применением хромогенного и флюорогенного субстратов.

Тип питательной среды: элективный
Назначение изделия: бульон
Форма выпуска: порошок
Масса упаковки: 500 г
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Происхождение: животного происхождения

Исследуемые образцы

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Состав

Состав среды на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон Rapid HiColiform представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Среда предназначена для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды с использованием хромогенного и флюорогенного субстратов.

Флюорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, специфически присутствующим у Escherichia coli. Положительная реакция проявляется появлением синей флуоресценции при облучении ультрафиолетовым светом.

Присутствие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию среды, возникающему в результате расщепления хромогенного субстрата.

IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E.coli поверхность среды покрывают реактивом Ковача. При положительной реакции слой окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Функции компонентов

• Специальный пептон служит источником углеродных и азотсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ.
• Сорбитол является сбраживаемым углеводом.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 16,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации растворите 32,06 г M1453 в 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по требуемым ёмкостям.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Около 97 % штаммов E.coli являются β-D-глюкуронидазоположительными, однако отдельные штаммы могут давать отрицательную флуоресценцию.
2. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различную интенсивность роста на данной среде.
3. Для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Условия эффективности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид порошка: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Приготовленная среда

Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный раствор с небольшим осадком в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 1,60 % при 25 °C.

pH водного раствора: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Хранение сухого порошка: при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики и упаковка

Комплект поставки

• Бульон для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий HiMedia M1453-500G, 500 г.