Бульон для быстрого выделения E.coli и колиформных бактерий хромогенным и флюорогенным методом HiMedia M1453-500G (уп/500 гр)

Элективный бульон для быстрого выделения Escherichia coli и колиформных бактерий HiMedia M1453-500G с использованием хромогенных и флюорогенных субстратов. Применяется для анализа проб воды и пищевых продуктов; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения

Бульон Rapid HiColiform™ является модификацией среды LMX. Определение бактерий основано на реакции фермент-субстрат:

• Флюорогенный субстрат расщепляется ферментом $\beta$-D-глюкуронидазой, который специфичен для Escherichia coli. Результатом реакции является появление синей флуоресценции при облучении ультрафиолетовым (УФ) светом.
• Хромогенный субстрат расщепляется ферментами общих колиформных бактерий, что приводит к окрашиванию среды в сине-зелёный цвет.
• IPTG (изопропил-$\beta$-D-1-тиогалактопиранозид) усиливает синтез ферментов и повышает активность $\beta$-D-галактозидазы.

Для подтверждения наличия E. coli на поверхность среды наносят реактив Ковакса; при положительной реакции слой окрашивается в красный цвет в течение 2 минут.

Роль компонентов:

• Специальный пептон: источник углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Сорбитол: ферментируемый углевод.
• Фосфатные соли: обеспечивают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): селективный агент, подавляющий рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 16,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации использовать 32,06 г порошка на 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить по стерильным емкостям.

Работа с образцами

• Пищевые продукты: сбор и обработка проб проводятся согласно соответствующим методическим указаниям.
• Пробы воды: сбор и обработка осуществляются в соответствии с локальными стандартами и руководствами.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор с небольшим осадком в пробирках.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения применения

1. Около 97 % штаммов E. coli являются $\beta$-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут не проявлять флуоресценции.
2. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
3. Для окончательного подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от перепадов температур и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.