HiMedia M1453-100G Быстрый HiColiform бульон

Питательный бульон HiMedia M1453-100G Быстрый HiColiform бульон производства HiMedia предназначен для выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий с использованием хромогенного и флуорогенного субстратов. Препарат применяют для анализа проб воды и пищевых продуктов, при этом для окончательного подтверждения требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Быстрый HiColiform бульон рекомендован для выявления и подтверждения наличия Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе фермент-субстратной реакции с использованием комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов.

Тип образца:

• пищевые продукты;
• вода.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Быстрый HiColiform бульон представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Среда предназначена для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды по реакциям хромогенного и флуорогенного субстратов.

Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, характерным для Escherichia coli. Положительная реакция проявляется возникновением синей флуоресценции при ультрафиолетовом освещении.

Наличие общих колиформных бактерий определяется по появлению сине-зелёной окраски вследствие расщепления хромогенного субстрата. IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E. coli на поверхность среды наносят реактив Ковача. При положительной реакции слой окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Назначение компонентов:

• специальный пептон служит источником углеродных и азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ для роста;
• сорбитол является сбраживаемым углеводом;
• фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий;
• лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 16,03 г препарата и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации используйте 32,06 г M1453 на 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых продуктов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. 97 % штаммов E. coli являются положительными по β-D-глюкуронидазе, однако отдельные штаммы могут не давать флуоресценцию.
2. Микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на данной среде.
3. Для подтверждения необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета с небольшим осадком в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,60 % масс./об. при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM;
• # — ранее использовавшееся название Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить препарат в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Температура хранения и транспортировки по данным карточки: 15–25 °C.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Техническое отличие методики

В отличие от сред, основанных только на визуальном изменении окраски, Rapid HiColiform использует одновременно хромогенную реакцию для общих колиформных бактерий и флуорогенную реакцию β-D-глюкуронидазы для выявления Escherichia coli, с дополнительным подтверждением реактивом Ковача.