HiMedia M1453-100G Быстрый HiColiform бульон

Сухая питательная среда HiMedia M1453-100G Быстрый HiColiform бульон для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды. Использует комбинацию хромогенных и флуорогенных субстратов для экспресс-анализа; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Среда Rapid HiColiform™ является модификацией бульона LMX. Обнаружение микроорганизмов основано на ферментативных реакциях:

• Общие колиформы: наличие указывает сине-зелёное окрашивание среды вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• Escherichia coli: специфический фермент $\beta$-D-глюкуронидаза расщепляет флуорогенный субстрат, что проявляется в виде синей флуоресценции при облучении ультрафиолетом (УФ).

Изопропил-$\beta$-D-1-тиогалактопиранозид (IPTG) усиливает синтез ферментов и повышает активность $\beta$-D-галактозидазы. Для подтверждения наличия E. coli используют реактив Ковакса: при положительной реакции слой реагента окрашивается в красный цвет в течение 2 минут.

Роль компонентов:

• Специальный пептон: источник углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Сорбитол: ферментируемый углевод.
• Фосфатные соли: обеспечивают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): селективный агент, подавляющий рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.

Методика приготовления и использования

1. Приготовление стандартного раствора: суспендируйте 16,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Приготовление раствора двойной концентрации: суспендируйте 32,06 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
3. Растворение: при необходимости нагрейте среду до полного растворения компонентов.
4. Стерилизация: автоклавирование при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охлаждение: остудите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте по емкостям.

Область применения

• Анализ проб воды.
• Анализ пищевых продуктов.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готового раствора: светло-жёлтый прозрачный раствор с небольшим осадком в пробирках.
• Значение pH (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения метода

• Около 97 % штаммов E. coli являются $\beta$-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут не проявлять флуоресценции.
• Различные организмы могут иметь индивидуальные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Для окончательного подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию перед утилизацией.