Диагностическая питательная среда Бульон для обнаружения кишечной палочки HiMedia M1426-500G (уп/500 гр) для выявления Escherichia coli и колиформ в пробах воды методом мембранной фильтрации; состав стандартизирован для заданных параметров эффективности. Среда предназначена для обнаружения, дифференциации и количественного определения микроорганизмов; приготовленный бульон нельзя автоклавировать, а после регидратации необходимо использовать в течение 24 ч.

Назначение

Бульон M-E.coli предназначен для обнаружения, дифференциации и количественного определения Escherichia coli и колиформ в пробах воды методом мембранной фильтрации без дополнительного подтверждения при интерпретации цветной реакции.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: бульон
• Тип образца: пробы воды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Производитель: HiMedia

Состав

Состав приведён для 1 л среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон M-E.coli применяют для обнаружения и дифференциации Escherichia coli и колиформ в пробах воды методом мембранной фильтрации. Метод основан на использовании триптон-желчного агара для обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах; восстановление Escherichia coli происходит быстрее и позволяет получать более воспроизводимые результаты.

Пробу воды фильтруют через мембрану, после чего мембрану помещают на абсорбирующую подложку, насыщенную бульоном M-E.coli, и инкубируют в закрытых чашках Петри при 37 °C.

Хромогенная смесь выявляет активность глюкуронидазы Escherichia coli. Этот фермент позволяет дифференцировать Escherichia coli от других колиформ. Клетки Escherichia coli расщепляют хромогенную смесь с помощью глюкуронидазы, в результате чего колонии приобретают синюю окраску. Колиформы, отличные от Escherichia coli, восстанавливают ТТХ — хлорид 2,3,5-трифенилтетразолия — и окрашиваются в красный цвет. Полученное различие окраски позволяет интерпретировать результат без дополнительного подтверждения.

Триптон обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста. Желчные соли подавляют грамположительные микроорганизмы.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды и насыщение подложки

1. Суспендируйте 21,67 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите приготовленный бульон до 45–50 °C.
5. В асептических условиях внесите требуемый объём — от 2 до 5 мл — на стерильную абсорбирующую ватную подложку до её насыщения.
6. Используйте среду в течение 24 ч после регидратации.

Мембранная фильтрация

1. Отфильтруйте пробу воды через мембрану.
2. Поместите мембрану на стерильную абсорбирующую ватную подложку, насыщенную бульоном M-E.coli.
3. Инкубируйте мембрану в закрытой чашке Петри при 37 °C.
4. Интерпретируйте результат по окраске колоний: синяя окраска указывает на Escherichia coli, красная — на колиформы, отличные от Escherichia coli.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть β-глюкуронидаза-отрицательными.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.
3. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и локальным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,16 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• * Соответствующие номера WDCM.

• Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Условия обеспечения эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Техническое отличие метода

В составе среды используется хромогенная смесь, обеспечивающая дифференциацию Escherichia coli по синей окраске колоний и прочих колиформ по красной окраске за счёт активности глюкуронидазы и восстановления ТТХ соответственно.