HiMedia M133-100G Инокуляционный бульон для тестирования микро-витаминов

Инокуляционный бульон для тестирования микро-витаминов HiMedia M133-100G предназначен для подготовки инокулятов Lactobacilli, используемых в микробиологическом анализе витаминов. Среда применяется для поддержания стоковых культур и рутинного культивирования лактобацилл; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип действия и интерпретация

Лактобациллы (Lactobacillus) представляют собой род грамположительных факультативно анаэробных молочнокислых бактерий, которые перерабатывают лактозу и другие сахара в молочную кислоту. Образование молочной кислоты закисляет среду, что подавляет рост ряда патогенных микроорганизмов.

В микробиологическом анализе витаминов используются три типа сред: поддерживающие, инокуляционные/культивационные и тестовые. Бульон Micro Vitamin Test Inoculum Broth используется для содержания стоковых культур Lactobacilli и других тест-организмов, а также для подготовки инокулятов.

Компоненты среды:

• Протеозо-пептон и дрожжевой экстракт: источники азота, серы, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Декстроза (глюкоза): основной источник энергии.
• Полисорбат 80 (Tween 80): источник жирных кислот.
• Калия дигидрофосфат: буферный агент.

Методика проведения анализа и подготовки

Приготовление среды

1. Растворить 37,1 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить по емкостям и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.

Подготовка стоковых культур и инокулята

1. Стоковые культуры готовят путем инокуляции методом «укола» в трех повторностях (одна проба используется для поддержания стока, остальные — для подготовки инокулята).
2. Пересев культур следует проводить с интервалом в одну или две недели.
3. Перенести 16–24 часовую культуру Lactobacilli с агара Micro Vitamin Test Culture Agar в бульон Micro Vitamin Test Inoculum Broth.
4. После инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч центрифугировать культуру и слить супернатант.
5. Ресуспендировать осадок клеток в 10 мл стерильного физиологического раствора.
6. Повторить промывку еще дважды.
7. Разбавить промытую суспензию клеток базовой средой для анализа или иным способом до достижения требуемой плотности клеток.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 6,7 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор.
• Диапазон pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Ограничение: пересев культур должен осуществляться с интервалом в одну или две недели.
• Утилизация: все загрязненные материалы и использованные препараты подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации перед утилизацией.