HiMedia M133-100G Инокуляционный бульон для тестирования микро-витаминов

Питательная среда HiMedia M133-100G Инокуляционный бульон для тестирования микро-витаминов — порошковый бульон для приготовления посевного материала, содержащий 37,1 г среды на 1 л воды. Инокуляционный бульон применяют для подготовки посевного материала лактобацилл при микробиологическом анализе витаминов; готовую среду стерилизуют автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение

Среда рекомендована для приготовления посевного материала лактобацилл, используемых в микробиологическом анализе витаминов.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Среду также применяют для поддержания маточных культур лактобацилл и других тест-организмов, используемых в микробиологических анализах, для обычного культивирования лактобацилл при анализе витаминов и для подготовки посевного материала.

Состав

Состав среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Род Lactobacillus включает грамположительные факультативно-анаэробные молочнокислые бактерии. Молочнокислыми эти бактерии называют потому, что большинство представителей рода превращает лактозу и другие сахара в молочную кислоту. Лактобациллы широко распространены и обычно не являются патогенными; многие виды присутствуют в разлагающемся растительном материале.

Образование молочной кислоты подкисляет среду и подавляет рост некоторых вредных бактерий.

В микробиологических анализах обычно используют три типа сред:

• среды для поддержания культур;
• среды для приготовления посевного материала и культивирования;
• среды для проведения аналитического теста.

Пептон протеозы и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы азотом, серой, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Декстроза служит источником энергии. Полисорбат 80 является источником жирных кислот. Дигидрофосфат калия выполняет буферную функцию.

Приготовление среды

1. Взвесьте 37,1 г сухой среды и внесите в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте смесь до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по ёмкостям.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; указанное давление составляет 15 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно 0,10 МПа.
5. Охладите среду до 45–50 °C.

Подготовка посевного материала

Маточные культуры готовят посевом уколом в трёх повторностях. Одну пробирку используют для приготовления маточной культуры, а две другие — для подготовки посевного материала для анализов.

Культуры следует пересевать с интервалом 1 или 2 недели.

Для подготовки посевного материала:

1. Перенесите 16–24-часовую культуру лактобацилл из агара для тестирования микро-витаминов в инокуляционный бульон для тестирования микро-витаминов.
2. Инкубируйте культуру при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. Центрифугируйте культуру и слейте надосадочную жидкость.
4. Ресуспендируйте осаждённые центрифугированием клетки в 10 мл стерильного физиологического раствора.
5. Повторите отмывку клеток ещё два раза.
6. Разбавьте отмытую клеточную суспензию базальной средой для анализа или другим требуемым разбавителем до получения необходимой плотности клеток.

Процедура анализа витаминов: используйте стандартные методики проведения анализа.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,71 % при 25 °C.

pH по контролю качества: 6,50–6,90.

Технические характеристики

Приготовление и обращение с образцами

Маточные культуры готовят посевом уколом в трёх повторностях: одну используют для получения маточной культуры, две — для подготовки посевного материала для анализов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Культуры следует переносить с интервалом 1 или 2 недели.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую среду при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при 15–25 °C.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, поскольку гигроскопичность может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила безопасной работы в микробиологической лаборатории. При работе с образцами применяйте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды с помощью автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методиками лабораторной работы.

Технические сведения производителя