HiMedia M127I-500G EC бульон

Селективная питательная среда HiMedia M127I-500G EC бульон представляет собой порошковый бульон массой 500 г для микробиологического анализа. Применяется для селективного количественного определения предположительно присутствующих Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (MPN), но не предназначен для прямого выделения колиформных бактерий.

Назначение

EC-бульон рекомендован для селективного количественного определения предположительно присутствующих Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (MPN). Среда используется при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов, а также для подтверждения наличия колиформных бактерий.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO/DIS 7251:2005, поправка 1:2023 (E), и ISO 11133:2014, поправка 2:2020 (E).

Состав

Сравнение с требованиями ISO

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Обозначения:

• # — эквивалент ферментативного гидролизата казеина.
• ## — эквивалент желчных солей № 3.

Принцип действия и интерпретация

EC-среда предназначена для выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов. Среда первоначально описана Hajna и Perry, позднее применялась Fishbein и Surkiewicz для подтверждающих тестов на Escherichia coli, а также используется в методах MPN и для подтверждения наличия колиформных бактерий.

При подтверждающем исследовании метод с EC-бульоном позволяет получить информацию об источнике колиформной группы — фекальном или нефекальном.

Среда не должна использоваться для прямого выделения колиформных бактерий, поскольку для оптимального восстановления фекальных колиформных бактерий требуется предварительное обогащение в presumptive-среде, то есть в среде предварительного выявления.

Функции компонентов:

• Триптон обеспечивает питательные вещества, необходимые для роста микроорганизмов.
• Лактоза является сбраживаемым сахаром.
• Смесь желчных солей подавляет грамположительные бактерии, особенно бациллы и фекальные стрептококки.
• Фосфаты калия регулируют pH в процессе сбраживания лактозы.
• Образование газа в ферментационной трубке в течение 24 ч или менее является предположительным признаком присутствия колиформных бактерий.

EC-бульон может использоваться:

• при 37 °C — для выявления колиформных микроорганизмов;
• при 44,5 °C — для выделения Escherichia coli из воды и ракообразных;
• при 45,5 °C — для исследования пищевых продуктов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. После внесения образца отрегулируйте концентрацию среды в соответствии с объёмом образца.

При использовании образца объёмом более 10 мл среду необходимо восстановить в концентрации, эквивалентной указанной в инструкции, с учётом последующего добавления образца.

Методика подтверждающего анализа

1. Перенесите петлёй культуру из всех пробирок с лаурилсульфатным бульоном M080, в которых в течение 24 ч образовался газ.
2. Также перенесите культуру из всех пробирок, в которых в течение 48 ч наблюдался рост бактерий, в пробирки с EC-бульоном.
3. Не позднее чем через 30 мин после внесения посевного материала поместите пробирки в водяную баню.
4. Инкубируйте пробирки при 44 °C в течение 24 ч.
5. Рост с образованием газа считайте положительной реакцией.
6. Рассчитайте плотность фекальных колиформных микроорганизмов с использованием таблиц MPN.

Тип исследуемого образца

Основной тип образца — пищевые продукты, включая пищевые продукты и корма для животных.

Интерпретация образования газа

• Образование газа при 44,5 °C или 45,5 °C, а также при 37 °C: Escherichia coli, возможно присутствие других колиформных бактерий.
• Образование газа только при 37 °C: колиформные бактерии без Escherichia coli.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

Ложноотрицательные реакции при восстановлении колиформных бактерий из систем водоснабжения могут возникать вследствие:

• низкого pH;
• хранения образцов в охлаждённом состоянии;
• применения бактерицидных или бактериостатических веществ.

EC-бульон не предназначен для прямого выделения колиформных бактерий без предварительного обогащения в среде предварительного выявления.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный легко сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда: прозрачный раствор жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,7 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Селективность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики