HiMedia M1223I-100G L-орнитиндекарбоксилазный бульон

Сухая питательная среда HiMedia M1223I-100G L-орнитиндекарбоксилазный бульон для определения способности микроорганизмов декарбоксилировать L-орнитин. Рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции; состав и характеристики соответствуют стандарту ISO/TS 22964:2017.

Принцип измерения

Декарбоксилирование — это процесс, при котором бактерии, обладающие специфическим ферментом декарбоксилазой, воздействуют на карбоксильный конец (-COOH) аминокислот с образованием амина или диамина и углекислого газа CO₂. L-орнитин декарбоксилируется ферментом орнитиндекарбоксилазой с образованием диамина путресцина и CO₂.

Данный бульон основан на модификации Тейлора и рекомендован комитетом ISO для обнаружения декарбоксилирования орнитина у Cronobacter sakazakii.

Механизм анализа:

• Экстракт дрожжей обеспечивает азот и питательные вещества для роста бактерий.
• Глюкоза служит ферментируемым углеводом. На начальных этапах инкубации она ферментируется организмами с образованием кислоты, что приводит к изменению цвета индикатора бромкрезолового пурпурного (BCP) на жёлтый. Кислая среда стимулирует активность декарбоксилазы.
• Если организм вырабатывает соответствующий фермент (декарбоксилазу), L-орнитин расщепляется с образованием путресцина.
• Образование этого амина повышает pH среды, смещая её в сторону щелочности, что меняет цвет индикатора с жёлтого на пурпурный или фиолетовый.
• Если фермент не вырабатывается, среда остаётся кислой (жёлтого цвета).

Методика приготовления и использования

1. Растворите 14,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости прогрейте для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. После инокуляции (посева) поверхность среды в пробирках необходимо покрыть слоем минерального масла объёмом 2–3 мл.

Технические характеристики

Состав (ISO/TS 22964: 2017 и M1223I)

Состав среды идентичен для спецификации ISO и модификации M1223I, г/л:

Общие параметры

• Происхождение: без содержания компонентов животного происхождения (микробное)
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от светло-жёлтого до светло-зелёного, однородный, свободнотекучий
• Цвет и прозрачность готовой среды: тёмно-пурпурный прозрачный раствор без осадка
• pH готового раствора (1,4 %): 6,60–7,00 (при 25 °C)
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов. Пробирки с посевом покрыты минеральным маслом.

*Соответствующие номера WDCM

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Сбор и обработка образцов должны проводиться в соответствии с установленными руководствами.

Ограничение: Покрытие среды минеральным маслом является обязательным условием для предотвращения ошибочных результатов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасной утилизации путём автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.