HiMedia M1223I-100G L-орнитиндекарбоксилазный бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1223I-100G L-орнитиндекарбоксилазный бульон производства HiMedia предназначена для выявления способности микроорганизмов декарбоксилировать орнитин. Бульон используют при исследовании пищевых и молочных образцов, при этом после посева пробирки необходимо покрывать 2–3 мл минерального масла для предотвращения ошибочных результатов.

Назначение

Среда рекомендована для выявления способности микроорганизмов декарбоксилировать орнитин. Состав и характеристики среды соответствуют требованиям ISO/TS 22964:2017 для горизонтального метода выявления Cronobacter spp. в пищевой цепи.

Состав

Спецификация ISO/TS 22964:2017 — бульон для декарбоксилирования L-орнитина

M1223I — бульон для декарбоксилирования L-орнитина

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с характеристиками эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Декарбоксилирование — процесс, при котором бактерии, обладающие специфическим ферментом декарбоксилазой, воздействуют на аминокислоты со стороны карбоксильной группы (–COOH), образуя амин или диамин и углекислый газ (CO₂).

Аминокислота L-орнитин декарбоксилируется ферментом орнитиндекарбоксилазой с образованием диамина путресцина и углекислого газа (CO₂).

Бульон для декарбоксилирования орнитина основан на модификации Тейлора. Среда рекомендована комитетом ISO для выявления декарбоксилирования орнитина у Cronobacter sakazakii.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• дрожжевой экстракт обеспечивает азот и другие питательные вещества, необходимые для роста бактерий;
• L-орнитин добавлен для выявления продукции орнитиндекарбоксилазы;
• глюкоза является ферментируемым углеводом;
• на начальных этапах инкубации микроорганизмы ферментируют глюкозу с образованием кислоты, что вызывает изменение окраски индикатора pH — бромкрезолового пурпурного (BCP) — на жёлтую;
• кислая реакция среды стимулирует активность декарбоксилазы;
• если микроорганизм продуцирует соответствующий фермент, орнитин разрушается с образованием путресцина;
• образование путресцина повышает pH среды в щелочную сторону и изменяет окраску индикатора с жёлтой на пурпурную или фиолетовую;
• если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и сохраняет жёлтую окраску.

Методика приготовления среды

1. Приостановите 14,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
3. Разлейте среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. После инокуляции покройте содержимое пробирок 2–3 мл минерального масла.

Образцы

Тип образцов: пищевые и молочные продукты.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, лёгкосыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор тёмно-пурпурного цвета без осадка.

Реакция

Реакция 1,4%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Инокулированные пробирки покрывают минеральным маслом.

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой упаковке. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон. Гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Ненадлежащие условия хранения также могут вызвать комкование.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте упаковку. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

Покрытие среды минеральным маслом является обязательным для предотвращения ошибочной интерпретации результатов.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Указания по безопасности могут содержаться в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.