Орнитиндекарбоксилазный бульон HiMedia M1223-100G (уп/100 гр)

Биохимический питательный бульон Орнитиндекарбоксилазный бульон HiMedia M1223-100G (уп/100 гр) — сухая среда для выявления способности микроорганизмов декарбоксилировать орнитин. Применяется для биохимической идентификации микроорганизмов по образованию путресцина; результат оценивают по изменению цвета среды с жёлтого на пурпурный или фиолетовый, а при отсутствии фермента среда остаётся жёлтой.

Назначение

Орнитиндекарбоксилазный бульон предназначен для выявления способности микроорганизмов образовывать фермент орнитиндекарбоксилазу и декарбоксилировать аминокислоту L-орнитин. Среда используется для биохимической идентификации, в том числе при выявлении декарбоксилирования орнитина у Yersinia enterocolitica.

Форма выпуска: сухой порошок
Фасовка: 100 г
Назначение изделия: бульон
Производитель: HiMedia
Регистрационный документ: ФСЗ 2009/03705

Состав

Формула на 1 л среды:

Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип измерения и интерпретация

Декарбоксилирование — процесс, при котором бактерии, обладающие специфическим ферментом-декарбоксилазой, воздействуют на аминокислоту со стороны карбоксильной группы (−COOH), образуя амин или диамин и углекислый газ (CO₂).

L-орнитин декарбоксилируется ферментом орнитиндекарбоксилазой с образованием диамина путресцина и углекислого газа (CO₂).

Орнитиндекарбоксилазный бульон основан на модификации Тейлора. Среда рекомендована комитетом ISO для выявления декарбоксилирования орнитина у Yersinia enterocolitica.

Функции компонентов среды:

• Дрожжевой экстракт обеспечивает азот и другие питательные вещества, необходимые для роста бактерий.
• Орнитин используется для выявления образования орнитиндекарбоксилазы.
• Глюкоза является сбраживаемым углеводом.
• Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH.

На начальных этапах инкубации микроорганизмы сбраживают глюкозу с образованием кислоты. Кислая реакция вызывает изменение цвета индикатора бромкрезолового пурпурного на жёлтый и одновременно стимулирует активность декарбоксилазы.

Если микроорганизм образует соответствующий фермент-декарбоксилазу, орнитин разрушается с образованием путресцина. Образование этого диамина повышает pH среды в сторону щелочной реакции, вследствие чего цвет индикатора изменяется с жёлтого на пурпурный или фиолетовый.

Если микроорганизм не образует соответствующий фермент, среда сохраняет кислую реакцию и жёлтую окраску.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 9,01 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин под давлением 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,10 МПа.
5. После инокуляции покройте содержимое пробирок 2–3 мл минерального масла.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Инокулированные пробирки покрывают минеральным маслом.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор тёмно-пурпурного цвета без осадка.

Реакция: реакция 0,9%-ного водного раствора при 25 °C; pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Технические характеристики

Методическое основание

Среда основана на модификации Тейлора и предназначена для выявления декарбоксилирования орнитина методом изменения pH-индикатора в процессе ферментативной реакции. ━━━━━