Питательная микробиологическая среда HiMedia M121-5KG 2% желчный бульон с бриллиантовым зелёным — порошкообразный бульон массой 5 кг для выявления и подтверждения бактерий группы кишечной палочки. Среда применяется при анализе воды, сточных вод, пищевых продуктов, молока и молочных продуктов; образование газа подтверждает положительный предполагаемый результат в течение 48 ± 2 ч.

Назначение и область применения

HiMedia M121-5KG используется для выявления и подтверждения бактерий группы кишечной палочки в следующих типах образцов:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• вода;
• сточные воды.

Среда предназначена для предполагаемой идентификации и подтверждения бактерий группы кишечной палочки. Методика также применяется для количественного определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

* Эквивалент бычьей желчи Oxgall.

Принцип действия и интерпретация

Пептон служит источником необходимых питательных веществ. Лактоза является ферментируемым углеводом. Желчь подавляет рост грамположительных бактерий, а бриллиантовый зелёный ингибирует грамотрицательные бактерии.

Образование газа при ферментации лактозы выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюрхама, помещённой в пробирку с питательной средой. Образование газа указывает на положительный результат в отношении фекальных колиформных бактерий, поскольку нефекальные колиформные бактерии, растущие на этой среде, газ не образуют. Дополнительное образование газа в бульоне EC (M127) при 45 °C используют для подтверждения наличия фекальных колиформных бактерий.

Грамположительные спорообразующие микроорганизмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется вследствие взаимодействия с пищевым материалом.

Среда сформулирована в соответствии с методиками APHA и рекомендована комитетом ISO для определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа.

Пересев из положительных проб

При исследовании образцов воды рост из предположительно положительных пробирок с образованием газа в лактозном бульоне (M026) или лаурил-триптозном бульоне (M080) пересевают в 2%-ный желчный бульон с бриллиантовым зелёным (M121). Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает положительный предполагаемый результат.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 40,01 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленный бульон в пробирки для ферментации с перевёрнутыми трубками Дюрхама.
4. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — 15 фунтов/дюйм² (≈0,10335 МПа).
5. Для приготовления среды двойной концентрации растворите 80,02 г порошка в 1 л воды.
6. Нагрейте растворённый бульон двойной концентрации до 100 °C и выдерживайте 30 мин.
7. Не автоклавируйте бульон двойной концентрации.

Требования к образцам и обращению

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с установленными методическими указаниями. Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб с учётом методических указаний и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до светло-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 4,0 % масса/объём при 25 °C.

• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее этот микроорганизм назывался Enterobacter aerogenes.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Хранить продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 15–25 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом состоянии; бутылку необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Ограничения применения

1. Не автоклавировать бульон двойной концентрации.
2. Грамположительные спорообразующие микроорганизмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослаблено пищевым материалом.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.