HiMedia M121-5KG 2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым

Сухая питательная среда HiMedia M121-5KG 2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым для обнаружения и подтверждения колиформных бактерий. Применяется при анализе воды, сточных вод, пищевых продуктов, молока и молочных продуктов; вес упаковки составляет 5 кг.

Принцип измерения и интерпретация

2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым (Brilliant Green Bile Broth 2%) является одной из наиболее широко используемых сред для выявления колиформных бактерий. Состав разработан в соответствии с рекомендациями APHA для предварительной идентификации и подтверждения колиформ, а также рекомендован комитетом ISO для подсчета колиформ методом наиболее вероятного числа (MPN).

Механизм селективности:

• Пептон: источник основных питательных веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Желчь: подавляет рост грамположительных бактерий.
• Бриллиантовый зеленый: ингибирует рост грамположительных бактерий и некоторых грам-отрицательных.

Положительным результатом считается образование газа в результате ферментации лактозы, что фиксируется с помощью перевернутой трубки Дурхама. Это указывает на наличие фекальных колиформ, так как нефекальные колиформы в данной среде обычно не вырабатывают газ. Для дальнейшего подтверждения фекальных колиформ используется бульон EC (M127) при температуре 45 °C.

При анализе проб воды образцы, показавшие рост и газообразование в лактозном бульоне (M026) или лаурильном триптозном бульоне (M080), инокулируют в желчный бульон с бриллиантовым зеленым (M121). Образование газа в течение 48 ± 2 часов подтверждает положительный результат предварительного теста.

Состав

Состав, г/л:

Конечный pH (при 25 °C): 7,2 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление стандартной среды

1. Растворить 40,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить среду в ферментационные трубки, содержащие перевернутые трубки Дурхама.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Приготовление среды двойной концентрации

1. Растворить 80,02 г порошка в 1 литре воды.
2. Нагреть раствор при 100 °C в течение 30 минут.
3. Важно: среду двойной концентрации нельзя автоклавировать.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до светло-зеленого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: изумрудно-зеленый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 4,0% водного раствора при 25 °C составляет 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа проб воды, сточных вод, пищевых продуктов и молочной продукции. При сборе и обработке образцов следует руководствоваться соответствующими стандартами и локальными нормативами. После использования контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения и предостережения

• Запрещено автоклавировать среду двойной концентрации.
• Грамположительные спорообразующие организмы могут вырабатывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зеленого будет ослаблено при взаимодействии с компонентами пищевого продукта.
• При работе со средой использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.