Желчный бульон с бриллиантовым зеленым HiMedia M121-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Желчный бульон с бриллиантовым зеленым HiMedia M121-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для выявления колиформных бактерий и содержит 2 % желчи. Среда применяется для подтверждения присутствия колиформных микроорганизмов в воде, сточных водах, молоке, молочных и других пищевых продуктах; бульон двойной концентрации нельзя стерилизовать в автоклаве.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и подтверждения наличия колиформных бактерий в следующих типах образцов:

• вода;
• сточные воды;
• пищевые продукты;
• молоко;
• молочные продукты.

Желчный бульон с бриллиантовым зеленым 2 % применяют для предварительной идентификации и подтверждения колиформных бактерий, а также для подсчёта колиформных микроорганизмов методом наиболее вероятного числа. Методика составлена с учётом рекомендаций APHA и ISO 4831:1991.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Желчь эквивалентна Oxgall.

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

• Пептон служит источником необходимых питательных веществ.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом.
• Желчь ингибирует грамположительные бактерии.
• Бриллиантовый зелёный ингибирует грамотрицательные бактерии.
• Газ, образующийся при сбраживании лактозы, выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюрхема.
• Образование газа служит положительным признаком наличия фекальных колиформ, поскольку нефекальные колиформы, растущие в этой среде, газа не образуют.
• Дополнительное образование газа в бульоне EC (M127) при 45 °C используют для подтверждения наличия фекальных колиформ.
• Грамположительные спорообразующие микроорганизмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется в результате реакции с пищевым материалом.

При исследовании проб воды рост из предположительно положительных пробирок, в которых в лактозном бульоне (M026) или лаурилтриптозном бульоне (M080) образовался газ, пересевают в желчный бульон с бриллиантовым зелёным 2 % (M121). Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает положительный результат предварительного теста.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленный бульон в бродильные пробирки с перевёрнутыми трубками Дюрхема.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для приготовления среды двойной концентрации растворите 80,02 г порошка в 1 л воды.
6. Нагрейте растворённый бульон двойной концентрации до 100 °C и выдерживайте 30 мин.
7. Не стерилизуйте бульон двойной концентрации в автоклаве.

Тип образцов и обращение с ними

Пищевые и молочные образцы: отбор и обработку проб выполняют с применением соответствующих методик согласно действующим руководствам.

Образцы воды: отбор и обработку проб выполняют с применением соответствующих методик, руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Бульон двойной концентрации нельзя стерилизовать в автоклаве.
2. Грамположительные спорообразующие микроорганизмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослаблено пищевым материалом.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно пересыпающийся порошок кремового или бледно-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция

Реакцию определяют для водного раствора концентрацией 4,0 % мас./об. при 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Обозначения: * — соответствующие номера WDCM; # — ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании в пределах установленного срока годности при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать с применением автоклавирования и/или сжигания.

Лабораторные инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Методические особенности

В отличие от общего описания питательных бульонов, методика для M121 предусматривает выявление газа в перевёрнутой трубке Дюрхема как подтверждающего признака сбраживания лактозы;