Питательная микробиологическая среда HiMedia M121-2.5KG 2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым в форме порошка массой 2,5 кг. Среда предназначена для выявления и подтверждения колиформных бактерий в воде, сточных водах, пищевых продуктах, молоке и молочных продуктах; бульон двойной концентрации нельзя автоклавировать.

Назначение

Бриллиантовый зелёный желчный бульон 2 % применяют для предварительного выявления и подтверждения колиформных бактерий в следующих образцах:

• пищевые продукты;
• молоко и молочные продукты;
• вода;
• сточные воды.

Среда используется при исследовании воды, пищевых продуктов и молочной продукции, а также для количественного определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа (НВЧ). Рецептура разработана в соответствии с методиками Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA); применение среды также рекомендовано комитетом ISO для определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа.

Принцип действия и интерпретация

Пептон служит источником необходимых питательных веществ. Лактоза является сбраживаемым углеводом. Желчь подавляет рост грамположительных бактерий, а бриллиантовый зелёный ингибирует рост грамотрицательных бактерий.

Газ, образующийся при сбраживании лактозы, выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюрхама, помещённой в пробирку с питательной средой. Образование газа свидетельствует о положительной реакции на фекальные колиформные бактерии, поскольку нефекальные колиформные бактерии, растущие в этой среде, газ не образуют.

Дополнительное образование газа в среде EC-бульона M127 при 45 °C используют для подтверждения наличия фекальных колиформных бактерий. Спорообразующие грамположительные бактерии могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется в результате взаимодействия с компонентами пищевого материала.

При исследовании проб воды материал из предположительно положительных пробирок, в которых наблюдалось образование газа в лактозном бульоне M026 или лаурилтриптозном бульоне M080, пересевают в бриллиантовый зелёный желчный бульон 2 % M121. Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает предположительно положительный результат.

Среда эквивалентна среде на основе бычьей желчи Oxgall.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

• Тип продукта: стандартный
• Назначение изделия: бульон
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 2,5 кг
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 40,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленный бульон в пробирки для ферментации с перевёрнутыми трубками Дюрхама.
4. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Для приготовления среды двойной концентрации растворите 80,02 г порошка на 1 л воды.
6. Нагрейте растворённый бульон двойной концентрации до 100 °C и выдерживайте 30 мин.
7. Не автоклавируйте бульон двойной концентрации.

Типы образцов и обращение с ними

Для образцов пищевых продуктов и молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим методическим указаниям.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно методическим указаниям и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Однородный, сыпучий порошок от кремового до бледно-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 4,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее — Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

• Бульон двойной концентрации нельзя автоклавировать.
• Спорообразующие грамположительные бактерии могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослаблено вследствие взаимодействия с пищевым материалом.
• Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, использовании продукта до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Хранить сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при температуре 15–25 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы необходимо утилизировать в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы согласно действующим лабораторным методикам.