Питательная микробиологическая среда HiMedia M121-1KG 2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым в форме порошка массой 1 кг. Среда предназначена для выявления и подтверждения колиформных бактерий в воде, сточных водах, пищевых продуктах, молоке и молочных продуктах; ограничение применения — двойной концентрат нельзя автоклавировать.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и подтверждения колиформных бактерий в следующих типах образцов:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• вода;
• сточные воды.

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Эквивалентен Oxgall.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация результатов

Желчный бульон с бриллиантовым зелёным 2 % предназначен для выявления колиформных бактерий в воде, сточных водах, пищевых продуктах, молоке и молочных продуктах. Среда сформулирована в соответствии с рекомендациями Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA) для предположительной идентификации и подтверждения колиформных бактерий. Среда также рекомендована комитетом ISO для количественного определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа.

Назначение компонентов:

• пептон служит источником необходимых питательных веществ;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• желчь подавляет грамположительные бактерии;
• бриллиантовый зелёный подавляет грамотрицательные бактерии.

Газ, образующийся при сбраживании лактозы, выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюргема. Образование газа указывает на положительный результат в отношении фекальных колиформных бактерий, поскольку нефекальные колиформные бактерии, растущие в этой среде, газа не образуют. Дополнительное образование газа в среде EC (M127) при 45 °C используют для подтверждения наличия фекальных колиформных бактерий.

Спорообразующие грамположительные бактерии могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется вследствие реакции с пищевым материалом.

При исследовании образцов воды рост из предположительно положительных пробирок, в которых газ образовался в лактозном бульоне (M026) или лаурилтриптозном бульоне (M080), пересевают в желчный бульон с бриллиантовым зелёным 2 % (M121). Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает предположительный результат.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 40,01 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленный бульон в бродильные пробирки с перевёрнутыми трубками Дюргема.
4. Стерилизуйте среду автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,103 МПа).
5. Для приготовления среды двойной концентрации растворите 80,02 г сухой среды в 1 л воды.
6. Растворённый бульон двойной концентрации рекомендуется нагревать при 100 °C в течение 30 мин.
7. Не автоклавируйте бульон двойной концентрации.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или бледно-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,0 % при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте бульон двойной концентрации.
2. Спорообразующие грамположительные микроорганизмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется пищевым материалом.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду храните при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при 15–25 °C.
• Используйте среду до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при рекомендованных условиях хранения.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных приготовленных сред посредством автоклавирования и/или сжигания.

Соблюдайте установленные лабораторные процедуры обращения с инфекционными материалами. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными