Питательная среда HiMedia M121-100G 2% желчный бульон с бриллиантовым зеленым представляет собой порошкообразный селективный бульон с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для обнаружения и подтверждения бактерий группы кишечной палочки в воде, сточных водах, пищевых продуктах, молоке и молочных продуктах; хранение требуется при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Назначение

Среда предназначена для предварительного обнаружения и подтверждения бактерий группы кишечной палочки в следующих образцах:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• вода;
• сточные воды;
• молоко.

Среда применяется для количественного определения бактерий группы кишечной палочки методом наиболее вероятного числа. Формула разработана с учётом рекомендаций Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA); среда также рекомендована комитетом ISO для подсчёта бактерий группы кишечной палочки методом наиболее вероятного числа.

Принцип действия и интерпретация

Пептон служит источником необходимых питательных веществ. Лактоза является ферментируемым углеводом. Желчь подавляет рост грамположительных бактерий, а бриллиантовый зелёный ингибирует грамотрицательные бактерии.

Образование газа при ферментации лактозы выявляют с помощью перевёрнутой трубки Дюрхема, помещённой в пробирку с культуральной средой. Наличие газа является положительным признаком фекальных колиформных бактерий, поскольку нефекальные колиформные бактерии, растущие в этой среде, газ не образуют.

Последующее образование газа в среде EC-бульона M127 при 45 °C используется для подтверждения наличия фекальных колиформных бактерий. Спорообразующие грамположительные бактерии могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослабляется вследствие реакции с пищевым материалом.

При исследовании образцов воды культуру из предположительно положительных пробирок, в которых обнаружено образование газа в лактозном бульоне M026 или лаурил-триптозном бульоне M080, пересевают в 2% желчный бульон с бриллиантовым зелёным M121. Образование газа в течение 48 ± 2 ч подтверждает предварительный результат.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Желчь эквивалентна Oxgall.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 40,01 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленный бульон в пробирки для ферментации, содержащие перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Приготовление среды двойной концентрации

Для получения среды двойной концентрации рекомендуется нагреть растворённый бульон в концентрации 80,02 г/л при 100 °C в течение 30 мин.

Среду двойной концентрации нельзя стерилизовать в автоклаве.

Тип образца

• Образцы пищевых и молочных продуктов.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до светло-зелёного цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор изумрудно-зелёного цвета без осадка.

Реакция

Реакция 4,0% водного раствора по массе к объёму при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при 15–25 °C.

Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Ограничения применения

1. Среду двойной концентрации нельзя стерилизовать в автоклаве.
2. Спорообразующие грамположительные организмы могут образовывать газ, если ингибирующее действие желчи или бриллиантового зелёного ослаблено пищевым материалом.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

Перед открыванием ёмкости прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Инфекционные материалы, а также материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лаборат