МРС бульон, модифицированный HiMedia M1164-500G (уп/500 гр)

Микробиологическая питательная среда МРС бульон, модифицированный HiMedia M1164-500G (уп/500 гр) — сухой порошок для выделения и культивирования видов Lactobacillus из салатных заправок. МРС-бульон применяют для предварительного выявления молочнокислых бактерий по образованию CO₂ и изменению окраски среды с зелёной на жёлтую; для окончательной идентификации необходимы дополнительные биохимические тесты.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выделения и культивирования видов Lactobacillus из образцов салатных заправок, включая майонез, заправки на основе варёного крахмала и текучие заправки.

Микроорганизмы в салатные заправки могут попадать из ингредиентов, производственного оборудования и воздуха. Микрофлора, вызывающая порчу салатных заправок, обычно ограничена небольшим числом видов Lactobacillus, Saccharomyces и Zygosaccharomyces.

Модифицированная среда МРС основана на модификации среды MRS по de Man, Rogosa и Sharpe. Среда применяется для выделения и культивирования видов Lactobacillus из салатных заправок; методика также рекомендована APHA для микробиологического исследования пищевых продуктов.

Принцип действия и интерпретация результатов

Протеозный пептон и декстроза обеспечивают азот, углерод и другие элементы, необходимые для роста лактобацилл. Полисорбат 80, представляющий собой смесь олеиновых эфиров, поставляет жирные кислоты, необходимые для роста лактобацилл.

Цитрат аммония, ацетат натрия, 2-фенилэтиловый спирт и циклогексимид подавляют рост грамотрицательных микроорганизмов, плесневых грибов и некоторых грамположительных бактерий. Циклогексимид также подавляет часть дрожжей.

Бромкрезоловый зелёный служит индикатором pH: в кислых условиях окраска среды изменяется с зелёной на жёлтую.

Положительным результатом при инкубации посевов являются задержанный CO₂ в трубках Дюрхема или пузырьки CO₂, прилипшие к внутренней поверхности пробирки, а также изменение окраски среды с зелёной на жёлтую, указывающее на образование кислоты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Приготовление среды

1. Взвесьте 62,2 г сухой среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 1 мл полисорбата 80.
2. Тщательно перемешайте.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. При необходимости после стерилизации скорректируйте pH ледяной уксусной кислотой.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика работы с образцами

Тип образца

Пищевые продукты.

Отбор, посев и инкубация

1. Внесите по 1 мл десятикратного разведения образца салатной заправки в три пробирки с модифицированным МРС-бульоном M1164.
2. Инкубируйте при 32 °C в течение 72 ч ± 2 ч.
3. Оцените пробирки на наличие задержанного CO₂ в трубках Дюрхема или пузырьков CO₂ на внутренней поверхности пробирки, а также изменение окраски среды с зелёной на жёлтую.
4. Предположительно положительные культуры подтвердите штриховым посевом на чашки с модифицированным МРС-агаром.
5. После использования загрязнённые материалы стерилизуйте автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый до голубовато-серого однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 6,22 % мас./об. при 25 °C.

Водородный показатель

pH: 5,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в присутствии 5–10 % углекислого газа (CO₂) после инкубации при 35–37 °C в течение до 3 суток.

Ключ: * соответствующие номера WDCM; ранее Lactiplantibacillus plantarum классифицировался как Lactobacillus plantarum.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность роста на среде.
2. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой и приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной работы и стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные приготовленные среды необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые