Тетратионатный бульон для мембранной технологии HiMedia M1115-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда HiMedia Тетратионатный бульон для мембранной технологии M1115-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — порошковая основа для селективного обогащения Salmonella с добавлением раствора йода. Среда предназначена для анализа проб воды методом мембранной фильтрации и требует дальнейшей биохимической и серологической идентификации выделенных микроорганизмов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного обогащения Salmonellae с использованием метода мембранной фильтрации.

• Тип питательной среды: элективный бульон
• Назначение изделия: бульон, порошковая основа
• Тип образца: пробы воды
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация

Среды обогащения способствуют размножению определённого вида микроорганизмов как этапу его последующего выделения в чистую культуру.

Тетратионатный бульон для мембранной технологии приготовлен по формуляции Каблера и Кларка для селективного обогащения Salmonella методом мембранной фильтрации. Формуляция аналогична тетратионатному бульону, за исключением карбоната кальция. Основа тетратионатного бульона первоначально была описана Мюллером; было установлено, что среда селективно подавляет колиформные микроорганизмы и обеспечивает неограниченный рост кишечных патогенов.

• Протеозный пептон обеспечивает азотистые и углеродсодержащие питательные вещества для бактериального метаболизма.
• Тетратионат образуется после добавления раствора йода.
• Селективность среды определяется совместным действием тиосульфата и тетратионата, подавляющих комменсальные микроорганизмы.
• На среде могут расти только микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой.
• Желчные соли подавляют многие грамположительные микроорганизмы.

Приготовление среды и методика проведения анализа

1. Суспендируйте 3,6 г порошка в 100 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Охладите приготовленную основу.
4. Добавьте 2 мл раствора йода, содержащего 0,5 г йодида калия и 0,6 г кристаллического йода.
5. Используйте готовую среду в день приготовления.
6. Пропитайте абсорбирующие подушечки в чашках Петри диаметром 5–6 см 2 мл бульона.
7. Поместите на подушечки мембранный фильтр с посевным материалом.
8. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 3 ч.
9. Перенесите мембранный фильтр с посевным материалом на абсорбирующие подушечки, пропитанные 2 мл бульона с бриллиантовым зелёным для мембранной технологии (M1102).
10. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 15–24 ч.

Сбор и обработка образцов

1. Поместите стерильные хлопковые абсорбирующие подушечки в чашки Петри диаметром 5–6 см.
2. Пропитайте подушечки 2 мл основы тетратионатного бульона для мембранной технологии.
3. Поместите на подушечки мембранный фильтр с посевным материалом.
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 3 ч.
5. Перенесите мембранный фильтр с посевным материалом на абсорбирующие подушечки, пропитанные 2 мл бульона с бриллиантовым зелёным для мембранной технологии (M1102).
6. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 15–21 ч.
7. После инкубации в бульоне с бриллиантовым зелёным добавьте на абсорбирующие подушечки реактив для уреазного теста следующего состава: мочевина — 20 г, бромтимоловый синий — 0,16 г, феноловый красный — 0,2 г, дистиллированная вода — до 1000 мл.
8. Выдержите 15–20 мин, чтобы реактив диффундировал по всей среде и обеспечил развитие окраски.
9. После использования автоклавируйте загрязнённые материалы перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Белый или светло-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор янтарного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 3,6 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 8,0 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 7,80–8,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления раствора йода, содержащего йодид калия и кристаллический йод, и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость, сухое проветриваемое помещение
• Защита при хранении: от экстремальных температур и источников воспламенения
• Приготовленная среда: использовать свежеприготовленной, в день приготовления
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия плотно закройте флакон и храните продукт в сухом виде. Порошок обладает гигроскопичностью; попадание влаги может привести к образованию комков. После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для дальнейшей идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на среде.
3. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При работе с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать пригодность среды с учётом специфических требований исследования.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом — после автоклавирования и/или сжигания.