Бульон с бриллиантовым зеленым для мембранной технологии HiMedia M1102-500G (уп/500 гр)

Селективная дифференциальная среда Бульон с бриллиантовым зеленым для мембранной технологии HiMedia M1102-500G (уп/500 гр) предназначена для первичного скрининга Salmonella в загрязненной воде. Применяется методом мембранных фильтров; имеет сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию агара с бриллиантовым зеленым без агара в двойной концентрации. Salmonella относятся к семейству Enterobacteriaceae (грамотрицательные, факультативно анаэробные, неспорообразующие палочки), которые трудно дифференцировать биохимически от Escherichia coli.

В составе среды:

• Протеозопептон и дрожжевой экстракт: источники углерода, азота, витаминов и минералов.
• Лактоза и сахароза: источники углерода и энергии.
• Хлорид натрия: обеспечивает необходимые ионы.
• Феноловый красный: pH-индикатор.
• Бриллиантовый зеленый: ингибитор грамположительных и большинства грамотрицательных бактерий, за исключением Salmonella.

Salmonella не способны ферментировать лактозу и сахарозу в данной среде, что позволяет идентифицировать их на фоне сопровождающих микроорганизмов, которые могут быть слабо лактозоположительными или лактозоотрицательными, но сахарозоположительными.

Методика проведения анализа

1. Известный объем воды пропускают через мембранный фильтр.
2. Фильтр помещают на абсорбирующую подушечку, насыщенную бульоном M-Тетратионат (M1115).
3. Инкубируют в увлажненной атмосфере 3 часа при 35 °C.
4. Мембрану переносят на другую абсорбирующую подушечку, насыщенную бульоном с бриллиантовым зеленым (M-Brilliant Green Broth), и продолжают инкубацию еще 15 часов при 35 °C.
5. После суммарной инкубации в течение 18 часов мембрану переносят на свежую подушечку, пропитанную реагентом для теста на уреазу (состав: 20 г мочевины, 0,16 г бромтимолового синего, 0,2 г фенолового красного на 1 л дистиллированной воды).
6. Результат реакции на уреазу фиксируют через 20 минут.

Интерпретация результатов:

• Пурпурные колонии (уреазоположительные, лактозо- и сахарозоотрицательные) — вероятно, виды Proteus.
• Желтые колонии (уреазоотрицательные, лактозо- или сахарозоположительные) — колиформы.
• Розовые или красные колонии (уреазоотрицательные, лактозо- и сахарозоотрицательные) — вероятно, кишечные патогены.

Из-за диффузии окраски реагента по всей поверхности мембраны отбор красных или розовых колоний для последующего пересева и серологических тестов рекомендуется проводить в течение 15–30 минут после нанесения реагента.

Приготовление и использование

1. Растворить 76,19 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
4. Охладить до 35 °C.
5. Насытить стерильную абсорбирующую хлопковую подушечку 2 мл приготовленного бульона.
6. Использовать среду в течение 24 часов после восстановления.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Физико-химические свойства

• Конечный pH (при 25 °C): 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Внешний вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета
• Цвет и прозрачность раствора: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор зеленовато-коричневого цвета

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч на мембранном фильтре в увлажненной атмосфере.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.