Бульон с бриллиантовым зеленым для мембранной технологии HiMedia M1102-500G (уп/500 гр)

Селективная дифференциальная питательная среда Бульон с бриллиантовым зеленым для мембранной технологии HiMedia M1102-500G (уп/500 гр) с конечным pH 6,9 ± 0,2. Среда предназначена для первичного выявления Salmonella в загрязнённой воде методом мембранной фильтрации и не подлежит автоклавированию.

Назначение

M-Brilliant Green Broth применяют как селективную дифференциальную среду для первичного скрининга Salmonella в загрязнённой воде с использованием мембранной фильтрации.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 76,19 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите приготовленную среду до 35 °C.
5. Насытьте стерильную абсорбирующую ватную подушку 2 мл бульона.
6. Используйте среду не позднее чем через 24 ч после регидратации.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella — грамотрицательные факультативно-анаэробные неспорообразующие палочковидные бактерии семейства Enterobacteriaceae. Микроорганизмы широко распространены среди животных и преимущественно поражают желудок и кишечник. Биохимически Salmonella трудно отличить от Escherichia coli.

Среда представляет собой модификацию бульона с бриллиантовым зелёным без агара, приготовленного в двойной концентрации. Salmonella не ферментирует лактозу и сахарозу, что позволяет выявлять сопутствующие микроорганизмы, слабо ферментирующие лактозу или не ферментирующие её, но ферментирующие сахарозу.

Назначение компонентов:

• протеозопептон и дрожжевой экстракт — источники углерода, азота, витаминов и минеральных веществ;
• лактоза и сахароза — источники углерода и энергии;
• хлорид натрия — источник необходимых ионов;
• феноловый красный — индикатор pH;
• бриллиантовый зелёный — ингибитор грамположительных и большинства грамотрицательных бактерий, за исключением Salmonella.

Методика мембранной фильтрации

1. Пропустите через мембранный фильтр подходящий и известный объём воды.
2. Поместите мембранный фильтр на абсорбирующую подушку, насыщенную бульоном с тетратионатом (M-Tetrathionate Broth, M1115).
3. Инкубируйте в атмосфере с повышенной влажностью в течение 3 ч при 35 °C.
4. Перенесите мембранный фильтр на другую абсорбирующую подушку, насыщенную бульоном с бриллиантовым зелёным.
5. Продолжайте инкубацию в течение ещё 15 ч при 35 °C.
6. После общей инкубации в течение 18 ч перенесите мембранный фильтр на свежую подушку, пропитанную реагентом для теста на уреазу.
7. Зарегистрируйте реакцию на уреазу через 20 мин.

Рекомендуемый состав реагента для теста на уреазу:

• мочевина — 20 г;
• бромтимоловый синий — 0,16 г;
• феноловый красный — 0,2 г;
• дистиллированная вода — до 1 л.

Реагент для теста на уреазу предназначен для применения в мембранной фильтрации при скрининге Salmonella.

Интерпретация окраски колоний

• Фиолетовые колонии, положительные по уреазе и отрицательные по ферментации лактозы и сахарозы, вероятно, относятся к роду Proteus.
• Жёлтые колонии, отрицательные по уреазе и положительные по ферментации лактозы или сахарозы, являются колиформными бактериями.
• Колонии от розовых до красных, отрицательные по уреазе и отрицательные по ферментации лактозы и сахарозы, вероятно, относятся к кишечным патогенам.

Окраска при реакции на уреазу со временем диффундирует по всей поверхности мембранного фильтра. Поэтому отбор красных или розовых колоний для дальнейшего пересевания и серологических исследований рекомендуется выполнять в течение 15–30 мин после распространения реагента.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор зеленовато-коричневого цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 7,62 % м/о при 25 °C соответствует pH 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации на мембранном фильтре во влажной атмосфере при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.