Дифференциальный бульон для клостридий модифицированный HiMedia M1085-500G (уп/500 гр)

Дифференциальный бульон для клостридий модифицированный HiMedia M1085-500G (уп/500 гр) — порошковая питательная среда с конечным pH 7,1 ± 0,2. Предназначен для количественного определения клостридий в пищевых продуктах и других образцах методом наиболее вероятного числа (MPN); среда неселективная, поэтому перед посевом требуется пастеризация для удаления вегетативных клеток.

Назначение

Дифференциальный бульон для клостридий модифицированный HiMedia M1085-500G рекомендован для количественного определения клостридий в пищевых продуктах и других образцах методом наиболее вероятного числа (MPN).

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

* Эквивалент мясного пептона.

† Эквивалент мясного экстракта.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным эксплуатационным параметрам.

Принцип измерения и интерпретация

Clostridium perfringens является нормальным обитателем кишечника. Несмотря на присутствие в меньшем количестве по сравнению с Escherichia coli, споры Clostridium perfringens способны длительное время выживать в воде и сохраняться после гибели других фекальных бактерий. Исследование воды на наличие клостридий позволяет выявлять отдалённое или периодическое загрязнение и подтверждать фекальное загрязнение в случаях, когда из воды выделяются только колиформные бактерии, отличные от Escherichia coli.

Модифицированный дифференциальный бульон для клостридий разработан для количественного определения спор сульфатредуцирующих клостридий в сухих пищевых продуктах. Среда является модификацией сред, разработанных Hirsch и Grinsted, а также Gibbs и Hirsch, и используется для количественного определения клостридий в пищевых продуктах и других образцах методом наиболее вероятного числа (MPN).

Дифференциация основана на выявлении способности микроорганизмов восстанавливать сульфит до сульфида с образованием сульфида железа — чёрного окрашенного комплекса. Среда не является селективной, поскольку другие бактерии также могут образовывать сульфид. Для количественного определения клостридий необходимо выполнить пастеризацию, удаляющую вегетативные клетки.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• триптон, дрожжевой экстракт, пептон HM и экстракт HM обеспечивают микроорганизмы источниками азота и углерода, необходимыми питательными веществами и факторами роста;
• крахмал нейтрализует токсичные метаболиты;
• питательный состав способствует прорастанию спор;
• декстроза является ферментируемым углеводом и служит источником углерода и энергии;
• гидрохлорид L-цистеина действует как восстановитель;
• бисульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему для выявления восстановления сульфита;
• резазурин является окислительно-восстановительным индикатором и помогает выявлять анаэробные условия в среде.

Для подавления неспорообразующих микроорганизмов в среду можно добавлять антибиотики, например полимиксин B.

Клостридии можно идентифицировать непосредственно в этом бульоне по образованию чёрного окрашивания; такое окрашивание маловероятно в усиленной клостридиальной среде (M443).

Для облегчения прорастания спор перед инокуляцией допускается термическая обработка спор или образцов при 80 °C в течение 10 мин.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 27,5 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении около 0,10 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Перед инокуляцией для облегчения прорастания спор образец или споры можно подвергнуть нагреванию при 80 °C в течение 10 мин.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор жёлтого цвета, который при выдерживании на воздухе вследствие аэрации становится красным.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 2,75 % (м/об.) при 25 °C.

pH: 6,90–7,30.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Ограничения применения

1. Для окончательной идентификации необходимо выполнять морфологические, биохимические и/или серологические исследования.
2. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать различные характеристики роста на этой среде.
3. Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При работе с конкретными микроорганизмами, не указанными в COA, пользователю рекомендуется валидировать пригодность среды с учётом специфических требований лаборатории.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: HiMedia M1085-500G Modified Differential Clostridial Broth
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: бульон
• Форма выпуска: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса упаковки: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Ёмкость: плотно закрытая
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке