Нейтрализующий бульон по Ди-Ингли HiMedia M1062-500G (уп/500 гр)

Нейтрализующий бульон по Ди-Ингли HiMedia M1062-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначен для нейтрализации и тестирования антисептиков и дезинфектантов. Среда используется при отборе проб из окружающей среды для определения бактерицидной активности химических веществ; состав соответствует МУ 3.5.2596-10.

Принцип измерения

Нейтрализующий бульон по Ди-Ингли (Dey-Engley Neutralizing Broth) разработан для нейтрализации широкого спектра антисептиков и дезинфицирующих средств, включая четвертичные аммониевые соединения, фенолы, препараты йода и хлора, ртутные соединения, формальдегид и глутаральдегид. Это позволяет определить, является ли вещество бактерицидным (убивающим бактерии) или бактериостатическим (подавляющим рост без уничтожения).

Функции компонентов среды:

• Триптон: источник азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и витаминов.
• Декстроза (глюкоза): энергетический ресурс.
• Экстракт дрожжей: источник витаминов группы B.
• Натрия бисульфит: нейтрализует альдегиды.
• Натрия тиогликоллат: нейтрализует ртутные соединения.
• Натрия тиосульфат: нейтрализует йод и хлор.
• Лецитин: нейтрализует четвертичные аммониевые соединения.
• Полисорбат 80 (Tween 80): неионогенное поверхностно-активное вещество, нейтрализует замещенные фенолы.
• Бромкрезоловый пурпурный: индикатор утилизации декстрозы.

Поскольку высокая концентрация лецитина вызывает помутнение, рост микроорганизмов определяется по изменению цвета: организмы, ферментирующие декстрозу, меняют цвет среды с пурпурного на жёлтый. Рост видов Pseudomonas, не ферментирующих декстрозу, обнаруживается по образованию плёнки на поверхности бульона.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 39,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам или колбам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить до 45–50 °C.

Тест на нейтрализацию

1. Подготовить две серии пробирок: одну с 9 мл нейтрализующего бульона по Ди-Ингли (M1062), вторую — с 9 мл базового нейтрализующего бульона по Ди-Ингли (M187, не содержащего нейтрализующих компонентов).
2. Добавить в каждую пробирку по 1 мл исследуемого дезинфектанта.
3. Перемешать и выдержать 15 минут.
4. Инокулировать 0,1 мл разведения 1:100 000 ночной бульонной культуры.
5. Инкубировать при 37 °C в течение 48 часов.

Интерпретация результатов:

• Рост в нейтрализующем бульоне при отсутствии роста в базовом бульоне указывает на успешную нейтрализацию дезинфектанта.
• Для проверки бактерицидной активности содержимое обеих пробирок пересевают на нейтрализующий агар по Ди-Ингли (M186).
• Положительный рост из «отрицательной» пробирки базового бульона свидетельствует о бактериостатическом действии вещества; отсутствие роста — о бактерицидном действии.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Область применения

Среда рекомендуется для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые продукты и молочная продукция.
• Образцы из окружающей среды (поверхности, воздух).
• Косметическая и фармацевтическая продукция.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до сизо-серого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: опалесцирующий раствор от пурпурного до красно-пурпурного цвета (возможен осадок в виде частиц).
• Реакция: pH 3,9% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,6 $\pm$ 0,2.

Культуральные характеристики

Наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–25 °C.
• Требования к помещению: сухое, вентилируемое место, защищенное от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
• Меры безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической работы в лаборатории.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03707.
• Тип среды: Базовый бульон.