Бульон для детекции гидролиза гиппурата HiMedia M1054-100G (уп/100 гр)

Бульон для детекции гидролиза гиппурата HiMedia M1054-100G (уп/100 гр) производства HiMedia предназначен для выявления микроорганизмов, гидролизующих гиппурат. Среда используется для дифференциации бета-гемолитических стрептококков групп A, B и D из клинических и неклинических образцов.

Принцип измерения

Определение основано на способности микроорганизмов гидролизовать гиппурат натрия с образованием бензойной кислоты в качестве конечного продукта. Данный тест позволяет дифференцировать бета-гемолитические стрептококки группы B (в том числе bovine и human), отделяя их от стрептококков группы A и неэнтерококковых стрептококков группы D.

В составе среды:

• Порошок HI (эквивалент порошка сердечного настоя) и пептон: обеспечивают основные питательные вещества для метаболизма бактерий.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Гиппурат натрия: служит субстратом для измерения гидролиза.

Методика проведения анализа

Приготовление реагента (хлорид железа)

1. В мерную колбу объемом 100 мл налейте примерно 75 мл дистиллированной воды.
2. С помощью пипетки аккуратно добавьте 5,4 мл концентрированной соляной кислоты (HCl), стекая по стенкам колбы.
3. Добавьте 12 г хлорида железа (FeCl₃).
4. Растворите содержимое, осторожно нагревая и перемешивая колбу.
5. Доведите объем раствора до 100 мл дистиллированной водой. Готовый раствор имеет оранжевый цвет.

Процедура анализа

1. Инокуляция: В пробирки с бульоном внесите 1–2 капли чистой бульонной культуры (возраст 18–24 часа) подтвержденного бета-гемолитического Streptococcus или 1–2 изолированные колонии с первичного посева.
2. Контроль: Обязательно используйте неинокулированную пробирку (отрицательный контроль) и культуру Streptococcus agalactiae (положительный контроль).
3. Инкубация: Инкубируйте пробирки с неплотно закрытыми крышками в течение 48 часов при температуре 35 ± 2 °C в аэробных условиях.
4. Подготовка пробы: После инкубации центрифугируйте все мутные культуры; для теста используйте супернатант (надосадочную жидкость).
5. Реакция: Асептически перенесите аликвоту культуры (или супернатанта) в маленькую пробирку. Добавьте 0,2 мл 12 % раствора FeCl₃.
6. Интерпретация: Немедленно встряхните пробирку. Выдержите 10–15 минут.
   • Положительный результат: сохраняется коричневый хлопьевидный нерастворимый осадок после встряхивания через 10 минут (гиппурат гидролизован).
   • Отрицательный результат: осадок растворяется при встряхивании (гиппурат не гидролизован).

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,4 ± 0,2
• pH диапазон: 7,20–7,60

Общие параметры

Область применения

Рекомендуется для анализа клинических образцов (в частности, фекалий) и неклинических проб. Применяется в микробиологических лабораториях для идентификации патогенных стрептококков.

Приготовление и стерилизация

1. Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Разлейте по 5 мл в пробирки или в другом требуемом объеме.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 3,5 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Важное ограничение: После добавления реагента FeCl₃ пробирку необходимо обязательно встряхнуть перед интерпретацией. Избыток FeCl₃ способствует растворению растворимых осадков гиппурата и глицината; отсутствие встряхивания может привести к ложноположительным результатам.
• Меры предосторожности: Только для диагностики in vitro и профессионального использования. Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица). Соблюдать стандартные правила работы с клиническими образцами и инфекционными материалами.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывайте бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по утилизации инфекционных материалов.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03705.