Порошкообразная питательная микробиологическая среда HiMedia M1046-100G MUG лаурилсульфатный бульон для флуорогенного выявления Escherichia coli в пищевых и водных образцах. Среда применяется для обнаружения кишечной палочки по флуоресценции под УФ-светом; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

MUG лаурилсульфатный бульон предназначен для выявления Escherichia coli в образцах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом.

Тип образцов:

• пищевые образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• Концентрация водного раствора для контроля реакции: 3,57 % масса/объём
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Принцип действия и интерпретация результатов

Лаурилсульфатный бульон был разработан Mallmann и Darby и применяется для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и сточных водах.

MUG добавляют в лаурилсульфатный бульон как флуорогенное соединение. Реакция позволяет быстро выявлять Escherichia coli при наблюдении под УФ-светом; дополнительное подтверждение в таком случае может не требоваться. MUG выявляет анаэрогенные штаммы, которые могут оставаться необнаруженными при традиционной методике.

MUG-содержащая среда используется для определения активности β-глюкуронидазы. Активность β-глюкуронидазы выявлена у:

• Escherichia coli: 96–100 %;
• видов Salmonella: 17 %;
• видов Shigella: 40 %;
• других родов: отрицательная реакция.

Для слабоположительных штаммов инкубацию следует проводить в течение ночи. По опубликованным данным, ложноотрицательные результаты не выявлялись, доля ложноположительных результатов составляла около 5 %.

Функции компонентов среды:

• триптон обеспечивает питательными веществами;
• лактоза служит источником энергии;
• лаурилсульфат натрия ингибирует многие микроорганизмы, не относящиеся к колиформам;
• 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид гидролизуется ферментом β-глюкуронидазой, присутствующим у соответствующих микроорганизмов, с образованием 4-метилумбеллиферона — флуоресцирующего конечного продукта реакции.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,65 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки с перевёрнутыми трубками Дюрхема. Количество среды в пробирках выбирают с учётом объёма исследуемого образца.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Отбор образцов и проведение анализа

1. Внесите по 10 мл исследуемого образца в три пробирки со средой обычной концентрации и в три пробирки со средой двойной концентрации.
2. Инкубируйте пробирки при 35 °C в течение 24 ч.
3. Оцените помутнение среды и образование газа.
4. Для подтверждения предположительного наличия Escherichia coli оцените флуоресценцию.
5. Выполните индольную реакцию с использованием реактива Ковача R008.
6. После использования автоклавируйте загрязнённые материалы перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 3,57 % масса/объём при 25 °C.
• pH: 6,60–7,00.
• Конечный pH: 6,8 ± 0,2 при 25 °C.

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

• Для предотвращения ошибочных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Для подтверждения результата следует дополнительно выполнять другие биохимические тесты.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный технический контекст

В отличие от традиционного лаурилсульфатного бульона, MUG лаурилсульфатный бульон содержит 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид, обеспечивающий дополнительную индикацию Escherichia coli по флуоресценции при 366 нм.

Комплект поставки

• Сухая питательная среда MUG лаурилсульфатный бульон, 100 г.