EC бульон с МУГ HiMedia M1042-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда EC бульон с МУГ HiMedia M1042-500G (уп/500 гр) — порошковая среда для флуорогенного выявления Escherichia coli. Применяется при анализе проб воды и пищевых продуктов; положительный результат регистрируют по ярко-синей флуоресценции после инкубации в течение 4–24 ч.

Назначение

Среда предназначена для выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктах флуорогенным методом.

Escherichia coli относится к группе фекальных колиформных бактерий и является представителем нормальной кишечной флоры теплокровных животных. Бактерия рассматривается как специфический индикатор фекального загрязнения и возможного присутствия кишечных патогенов.

MUG EC Broth также рекомендуется APHA для анализа питьевой, поверхностной, грунтовой и сточной воды на наличие Escherichia coli.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: бульон
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: HDPE

Принцип измерения и интерпретация

EC Broth был разработан Hajna и Perry и позднее модифицирован добавлением флуорогенного соединения MUG.

MUG обеспечивает быстрое выявление E. coli при наблюдении флуоресценции среды под УФ-светом. Соединение MUG гидролизуется ферментом β-глюкуронидазой, который присутствует у E. coli, с образованием флуоресцирующего конечного продукта 4-метилумбеллиферона. Метод также позволяет выявлять анаэрогенные штаммы, которые могут не определяться при использовании традиционной процедуры.

Функции компонентов среды:

• Триптон: источник необходимых питательных веществ.
• Лактоза: сбраживаемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотическое равновесие.
• Фосфатная система: обеспечивает выраженное буферное действие и контролирует pH при ферментативном сбраживании.
• Желчные соли: подавляют грамположительные бактерии, особенно виды Bacillus и фекальные стрептококки.

Ферментация лактозы лактозосбраживающими микроорганизмами приводит к подкислению среды и снижению pH. Корректировка pH культуры гидроксидом натрия усиливает флуоресценцию. Воздействие паров аммиака также усиливает флуоресценцию.

В большинстве случаев активность β-глюкуронидазы проявляется в течение 4 ч, однако некоторые слабые β-глюкуронидазоположительные штаммы требуют инкубации в течение ночи. При наличии большого количества Proteus vulgaris возможно подавление газообразования E. coli, однако флуоресценция позволяет выявлять E. coli в чистых или смешанных культурах через 4–24 ч.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,05 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 12–15 мин.

Методика исследования образцов

1. Внесите исследуемую пробу воды в PA-бульон (M1186) и лаурилсульфатный бульон (M080).
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. Все предположительно положительные пробирки, в которых наблюдаются рост, газообразование или подкисление, дополнительно исследуйте с использованием MUG EC Broth (M1042).
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–24 ч.
5. Наличие ярко-синей флуоресценции считают положительной реакцией на E. coli.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Водные образцы.

Ограничения метода

• Для предотвращения ошибочных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Интенсивность флуоресценции можно повысить добавлением 2–3 капель NaOH.
• Большое количество Proteus vulgaris может подавлять газообразование E. coli; при этом флуоресцентная реакция сохраняет возможность выявления E. coli в чистых и смешанных культурах.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор жёлтого цвета без осадка.

Реакция

• Реакция водного раствора с концентрацией 3,7 % масса/объём при 25 °C.
• pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.
• Klebsiella aerogenes ранее обозначалась как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой. При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать правила безопасной работы в микробиологической лаборатории. При работе с образцами следует выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Информацию по безопасности можно получить из соответствующих паспортов безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обезз