HiMedia M1042-100G MUG EC бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia M1042-100G MUG EC бульон предназначена для флуорогенного выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктах. Применяется после предварительного обогащения образца; положительный результат определяют по ярко-синей флуоресценции после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

Назначение

Бульон MUG EC предназначен для выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом. Среда применяется для анализа питьевой, поверхностной, подземной и сточной воды, а также для контроля пищевых образцов.

Принцип измерения и интерпретация

Escherichia coli относится к группе фекальных колиформных бактерий и входит в состав нормальной фекальной микрофлоры теплокровных животных. E. coli рассматривается как специфический индикатор фекального загрязнения и возможного присутствия кишечных патогенов.

Бульон EC был разработан Hajna и Perry и позднее модифицирован добавлением флуорогенного соединения 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида (MUG). MUG обеспечивает быстрое выявление E. coli при наблюдении флуоресценции среды в ультрафиолетовом свете. Соединение MUG также позволяет выявлять анаэрогенные штаммы, которые могут не обнаруживаться обычной методикой.

Фермент β-глюкуронидаза, присутствующий у E. coli, гидролизует MUG с образованием флуоресцирующего продукта — 4-метилумбеллиферона. Интенсивность флуоресценции оценивают при ультрафиолетовом освещении с длиной волны 366 нм.

Функции компонентов среды:

• Триптон обеспечивает необходимые питательные вещества.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фосфатная буферная система стабилизирует pH при ферментативном процессе.
• Смесь желчных солей ингибирует грамположительные бактерии, особенно виды Bacillus и фекальные стрептококки.

В большинстве случаев активность β-глюкуронидазы проявляется в течение 4 ч, однако для некоторых слабоположительных по β-глюкуронидазе штаммов требуется инкубация в течение ночи. Сбраживание лактозы лактозосбраживающими бактериями приводит к подкислению среды и снижению pH.

Корректировка pH культур гидроксидом натрия усиливает флуоресценцию. Воздействие паров аммиака также может усиливать флуоресценцию.

При наличии большого количества Proteus vulgaris возможно подавление газообразования E. coli, однако флуоресцентная реакция позволяет выявлять E. coli в чистых или смешанных культурах в течение 4–24 ч.

В отличие от обычной процедуры, флуорогенный метод на основе MUG позволяет обнаруживать анаэрогенные штаммы E. coli, не образующие газ.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 37,05 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюргема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 12–15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,10 МПа.

Пробоподготовка и проведение анализа

1. Инокулируйте исследуемую пробу воды в бульон PA (M1186) и лаурилсульфатный бульон (M080).
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. Все предположительно положительные пробирки, в которых наблюдаются рост, газообразование или кислотность, дополнительно исследуйте с использованием бульона MUG EC (M1042).
4. Инкубируйте MUG EC при 35–37 °C в течение 4–24 ч.
5. Наличие ярко-синей флуоресценции расценивайте как положительную реакцию на E. coli при освещении ультрафиолетовым светом с длиной волны 366 нм.
6. Для усиления флуоресценции допускается добавить 2–3 капли раствора гидроксида натрия (NaOH).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Пробы воды.

Ограничения применения

• Для получения достоверных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Флуоресценцию можно усилить добавлением 2–3 капель NaOH.
• Большое количество Proteus vulgaris может подавлять газообразование E. coli; в таких случаях для обнаружения E. coli используют флуоресцентную реакцию.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,7 % мас./об. при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке и использовании в пределах срока годности при рекомендованной температуре хранения.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M1042-100G
• Назначение изделия: бульон для флуорогенного выявления Escherichia coli
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности, HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Температура