М-бульон с лаурил-сульфатом для технологии мембранных фильтров HiMedia M1023I-500G (уп/500 гр)

Микробиологическая питательная среда М-бульон с лаурил-сульфатом HiMedia M1023I-500G (уп/500 г) производства HiMedia предназначена для подсчёта Escherichia coli и колиформных бактерий в воде методом мембранной фильтрации. Среда используется для санитарно-бактериологического контроля воды, при этом объём пробы выбирают так, чтобы на мембране образовалось от 10 до 100 колоний.

Назначение

М-бульон с лаурил-сульфатом применяется для количественного определения Escherichia coli и колиформных бактерий в воде методом мембранной фильтрации.

Изделие: бульон, сухая порошкообразная питательная среда.

Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация результатов

В среде Membrane Enriched Teepol Broth соли желчных кислот были заменены теполом для выявления колиформных микроорганизмов в воде методом мембранной фильтрации. М-бульон с лаурил-сульфатом аналогичен обогащённому теполом мембранному бульону, однако тепол в составе заменён лаурилсульфатом натрия. Лаурилсульфат натрия используется как воспроизводимая замена тепола.

Модификация M1023I предназначена для подсчёта колиформных бактерий в воде. Подсчёт E. coli и колиформных бактерий выполняют на отдельных пробах воды.

Объём проб выбирают таким образом, чтобы количество колоний на мембране находилось в диапазоне от 10 до 100. Пробы воды фильтруют через стерильный мембранный фильтр, после чего мембрану размещают рабочей поверхностью вверх на абсорбирующей подложке, насыщенной М-бульоном с лаурил-сульфатом.

Мембраны инкубируют в контейнере, предотвращающем испарение. Для инкубации мембран при 44 °C используют герметичные металлические контейнеры, помещённые в водяную баню с точным поддержанием температуры.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 77,2 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте среду одним из способов:
   • обработкой паром в течение 30 мин в каждый из трёх последовательных дней;
   • автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Фильтрация и инкубация

1. Отфильтруйте пробу воды через стерильный мембранный фильтр.
2. Перенесите мембрану рабочей поверхностью вверх на абсорбирующую подложку, насыщенную М-бульоном с лаурил-сульфатом.
3. Поместите мембрану в контейнер, предотвращающий испарение.
4. Инкубируйте мембрану в соответствии с типом пробы и определяемыми микроорганизмами.

Для нехлорированной воды:

• колиформные бактерии: 4 ч при 30 °C, затем 14 ч при 35 °C;
• Escherichia coli: 4 ч при 30 °C, затем 14 ч при 44 °C.

Для нехлорированной воды полезна предварительная инкубация в течение 4 ч при 30 °C. Для хлорированной воды требуется инкубация в течение 6 ч при 25 °C.

Подтверждение результатов

После инкубации образуются жёлтые колонии, результаты по которым необходимо подтвердить дополнительными испытаниями.

Отсутствие колоний нельзя автоматически интерпретировать как нулевой результат. При появлении небольших колоний промежуточной окраски мембрану возвращают на инкубацию до завершения полного периода.

E. coli образует жёлтые колонии на мембранах при инкубации при 44 °C. Для подтверждения газообразования и образования индола после 24 ч инкубации при 44 °C выполняют пересев:

• в лактозный бульон M1003 — для подтверждения газообразования;
• в триптонную воду M463I — для подтверждения образования индола.

Колиформные бактерии, образующие жёлтые колонии на мембранах при инкубации при 35–37 °C, пересевают в лактозный бульон M1003. Для проверки газообразования лактозный бульон инкубируют при 37 °C в течение 48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор красного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 7,72 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации в течение 18 ч при различных температурах.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: ниже 30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Комплект поставки

• М-бульон с лаурил-сульфатом HiMedia M1023I-500G, упаковка 500 г.

Техническое отличие методики

В составе M1023I тепол заменён лаурилсульфатом натрия, а для подсчёта E. coli и колиформных бактерий предусмотрены раздельные пробы воды и разные режимы инкубации мембран.