Питательная микробиологическая среда HiMedia M1023-38.6G M-лаурилсульфатный бульон (38,6 г) — сухой бульон для мембранной фильтрации воды. Среда предназначена для количественного определения Escherichia coli и колиформных микроорганизмов; температура и продолжительность инкубации зависят от хлорирования пробы.

Назначение

M-лаурилсульфатный бульон рекомендован для количественного определения Escherichia coli в воде методом мембранной фильтрации.

Тип образца: пробы воды.

Метод мембранной фильтрации применяют для анализа относительно больших объёмов проб. Метод используют при контроле питьевой воды и различных природных вод.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Ранее в средах для выявления колиформных микроорганизмов в воде в качестве селективного агента применяли желчные соли. Позднее этот компонент был заменён тииполом (Teepol); эффективность тиипола была продемонстрирована в последующих исследованиях. M-лаурилсульфатный бульон аналогичен такой среде, но вместо тиипола в качестве ингибирующего агента содержит лаурилсульфат натрия.

Для проведения анализа абсорбирующую подложку насыщают M-лаурилсульфатным бульоном. Через мембранный фильтр пропускают пробу воды, после чего фильтр асептически помещают на насыщенную абсорбирующую подложку рабочей поверхностью вверх.

Пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота, углерода и аминокислот. Лактоза является источником ферментируемых углеводов. Феноловый красный используют как индикатор. Лаурилсульфат натрия ингибирует грамположительные бактерии.

После инкубации образуются жёлтые колонии, которые необходимо дополнительно подтвердить.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 76,2 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в необходимую посуду.
4. Стерилизуйте одним из способов:
   • обработкой паром в течение 30 мин в течение трёх последовательных дней;
   • автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.

Методика инкубации

Для нехлорированной воды рекомендуются следующие режимы:

• колиформные микроорганизмы: 4 ч при 30 °C, затем 14 ч при 35 °C;
• Escherichia coli: 4 ч при 30 °C, затем 14 ч при 44 °C.

Микроорганизмы в нехлорированной воде получают преимущество при 4-часовой инкубации при 30 °C, тогда как для микроорганизмов в хлорированной воде требуется 6-часовая инкубация при 25 °C.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Из-за различий в пищевых потребностях некоторые штаммы могут расти слабо.
• При слишком высокой посевной дозе блеск колоний может быть подавлен.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор красного цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 7,62 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики на мембранном фильтре после инкубации при различных температурах в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название

Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Помещение для хранения: сухое, вентилируемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.