Дифференциальная питательная среда «Лактозный бульон Эйкмана HiMedia M086-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia предназначена для выявления и дифференциации Escherichia coli по способности ферментировать лактозу с образованием газа. Лактозный бульон Эйкмана применяется для анализа клинических образцов мочи и проб воды, при этом для подтверждения результата необходима дополнительная биохимическая идентификация.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и дифференциации Escherichia coli от других колиформных микроорганизмов по способности расти и выделять газ при ферментации лактозы.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: бульон
Форма выпуска: порошок
Происхождение: животное
Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Колиформные микроорганизмы — это лактозоферментирующие энтеробактерии, включая Escherichia coli и Enterobacter. Семейство Enterobacteriaceae представляет собой большую группу грамотрицательных бактерий, обитающих в кишечном тракте теплокровных животных и составляющих значительную часть микробной флоры фекалий человека.

Колиформные микроорганизмы легко выделяются и идентифицируются, поэтому используются как индикаторные организмы для контроля фекального загрязнения пищевых продуктов, воды и других образцов. E. coli относится к распространённым микроорганизмам, участвующим в грамотрицательном сепсисе и эндотоксин-индуцированном шоке.

Эйкман описал метод селективного выделения E. coli из фекалий теплокровных и холоднокровных животных. Метод имел ограничения: после пересевания из положительных пробирок, инкубированных при 46 °C, не всегда удавалось получить рост, поскольку сочетание повышенной кислотности и высокой температуры приводило к гибели культуры в течение 24–48 ч.

Перри и Хайна модифицировали исходный метод Эйкмана, снизив содержание углеводов и добавив фосфатный буфер. Это позволило проводить пересев E. coli после инкубации при 46 °C в течение 96 ч и более; pH модифицированной среды составлял 5,6 по сравнению с 4,5 у среды Эйкмана. Позднее Перри модифицировал среду Эйкмана, используя лактозу для выделения E. coli. Среда также может применяться для бактериологического исследования в рамках контроля фильтрации воды.

Триптоза и лактоза выполняют функции источника энергии и углерода соответственно. E. coli ферментирует лактозу с образованием кислоты и газа. Образующийся газ накапливается в виде пузырьков в перевёрнутых трубках Дюргема. Фосфаты обеспечивают буферную ёмкость среды, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Методика приготовления среды

1. Для приготовления стандартного объёма суспендируйте 28,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При исследовании порций проб воды объёмом 10 мл используйте 57,0 г среды на 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
4. Разлейте среду по пробиркам с перевёрнутыми трубками Дюргема для улавливания газа.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Образцы

Типы образцов:

• клинические образцы — моча;
• образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте надлежащие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для проб воды используйте надлежащие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Метод имеет ограничения, связанные с невозможностью получить рост после пересевания из положительных пробирок, инкубированных при 46 °C: сочетание кислотности и высокой температуры может привести к гибели культуры в течение 24–48 ч.
2. Для подтверждения результата необходима дальнейшая биохимическая идентификация.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с продуктом используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,85 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 45,5–46 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Из-за гигроскопичности продукта необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от исходного варианта метода Эйкмана, рецептура с пониженным содержанием углеводов, лактозой и фосфатным буфером рассчитана на сохранение возможности пересевания E. coli после инкубации при 46 °C в течение 96 ч и более; при этом контрольная культура после 24–48 ч при 45,5–46 °C демонстрирует обильный рост и положительное газообразование.