HiMedia M080-5KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный)

Сухая питательная среда HiMedia M080-5KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный) для выявления и подсчёта бактерий группы колиформ в воде, сточных водах, молочных продуктах и других пищевых пробах. Состав и показатели эффективности соответствуют спецификациям ISO 11133:2014 и поправке Amd:2018.

Принцип измерения и интерпретация

Лаурилсульфатный бульон используется для обнаружения колиформ — представителей семейства Enterobacteriaceae, которые способны расти в присутствии желчных солей и вырабатывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 часов при 37 °C. Данные бактерии характеризуются наличием β-галактозидазы.

Среда разработана для обеспечения обильного роста и выделения значительного количества газа даже при малых посевных дозах. Лаурилсульфат натрия делает среду селективной, подавляя рост организмов, не относящихся к колиформам, включая аэробные спорообразующие бактерии.

• Триптоза: обеспечивает основные питательные вещества (азот, углерод, сульфаты и микроэлементы).
• Фосфаты калия: создают буферную систему.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Лаурилсульфат натрия: ингибирует нецелевую микрофлору.

В рутинном анализе воды образование газа в данной среде служит не только предварительным, но и подтверждающим тестом на наличие колиформ.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 35,60 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить среду в пробирки, содержащие перевернутые трубки Дурхама.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Требования к концентрации:

• При посевной дозе 1 мл или менее использовать среду одинарной концентрации.
• При посевной дозе 10 мл и более готовить среду двойной или пропорционально увеличенной концентрации.

Процедура анализа и интерпретация

1. После инокуляции инкубировать пробирки при 37 °C в течение 24–48 часов.
2. Для каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация (первичная ферментация), подготовить две новые пробирки с лаурил-триптозным бульоном.
3. Перенести культуру из пробирки с первичной ферментацией в две новые и инкубировать их при 37 °C и 44 °C соответственно.
4. Если в пробирке, инкубированной при 44 °C, через 8–24 часов наблюдается ферментация, провести тест на индол с помощью реактива Ковача.
   • Положительный тест на индол (красное кольцо на границе раздела сред) в пробирке с газом при 44 °C указывает на присутствие Escherichia coli.
5. Если в пробирке при 37 °C через 24 часа ферментация отсутствует, первичная ферментация считается вызванной организмами, не относящимися к колиформам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

Культуральные характеристики

Инкубация при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 или 48 ± 2 часов.

Область применения и работа с образцами

Применяется для анализа проб воды, сточных вод, молочных и других пищевых продуктов.

• Сбор проб: Для пищевых и молочных продуктов использовать методы сбора согласно руководствам APHA и ISO. Для проб воды следовать местным стандартам и методикам.
• Утилизация: Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или сожжены в инсинераторе.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенность: при хранении при 2–8 °C бульон может стать мутным, но восстанавливает прозрачность при комнатной температуре.

Ограничения

1. Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести собственную валидацию среды.