Лаурил-сульфатный бульон HiMedia M080-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Лаурил-сульфатный бульон HiMedia M080-500G (уп/500 гр) — порошковый бульон для выявления колиформных микроорганизмов. Лаурил-сульфатный бульон применяют для выявления и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; аэробные спорообразующие микроорганизмы в среде полностью ингибируются.

Назначение и область применения

Среда предназначена для выявления и количественного определения колиформных бактерий в следующих образцах:

• вода;
• сточные воды и стоки;
• молочные продукты;
• другие пищевые продукты.

Среда применяется для предположительного выявления колиформных бактерий в воде, стоках и канализационных водах методом наиболее вероятного числа (НВЧ, MPN). Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 11133:2014 с поправкой 2018 года.

Лаурил-сульфатный бульон также рекомендован для выявления колиформных бактерий комитетом ISO и применяется в методиках, рекомендованных APHA.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформные микроорганизмы относятся к семейству Enterobacteriaceae. Для них характерны:

• рост в присутствии желчных солей;
• образование кислоты и газа из лактозы в течение 48 ч при 37 °C;
• наличие β-галактозидазы у типичных представителей.

Лаурил-сульфатный бульон предназначен для получения обильного роста и значительного количества газа при внесении небольшого объёма посевного материала, содержащего колиформные микроорганизмы. Образование газа в пробирке с перевёрнутой трубкой Дарема служит признаком ферментации лактозы.

Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность в отношении колиформных бактерий и ингибирует микроорганизмы, не относящиеся к колиформам. Аэробные спорообразующие микроорганизмы в среде полностью ингибируются.

Функции компонентов среды:

• триптоза обеспечивает микроорганизмы необходимыми соединениями азота и углерода, сульфатами и микроэлементами;
• фосфаты калия образуют буферную систему;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• лаурилсульфат натрия ингибирует микроорганизмы, отличные от колиформных бактерий;
• лактоза служит субстратом для выявления ферментации с образованием кислоты и газа.

Среда была разработана Mallmann и Darby. Включение лаурилсульфата натрия делает среду селективной для колиформных бактерий. Для лаурил-сульфатного бульона описан более высокий коли-индекс по сравнению со средами подтверждающих стандартных методов. Образование газа в лаурил-сульфатном бульоне служит не только предположительным, но и подтверждающим признаком присутствия колиформных бактерий при рутинном исследовании воды.

Состав

Формула рассчитана на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 35,60 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дарема.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для посевного материала объёмом 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
6. Для посевного материала объёмом 10 мл и более приготовьте среду двойной концентрации либо среду в пропорционально увеличенной концентрации.

Методика проведения анализа

1. После внесения посевного материала инкубируйте пробирки при 37 °C в течение 24–48 ч.
2. Из каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация — первичная ферментация, — выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным бульоном.
3. Инкубируйте одну пробирку при 37 °C, вторую — при 44 °C.
4. Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, ферментация происходит через 8–24 ч, выполните индольную пробу с добавлением реактива Ковача.
5. Положительная индольная проба в бульоне с газообразованием при 44 °C указывает на присутствие Escherichia coli.
6. Если в пробирке, инкубируемой при 37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, первичную ферментацию считают обусловленной микроорганизмами, не относящимися к колиформным.

При хранении бульона при 2–8 °C среда может мутнеть; при комнатной температуре мутность исчезает.

Тип образцов

• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и методикам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,56 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ±