HiMedia M080-2.5KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M080-2.5KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный) — порошковый бульон массой 2,5 кг для приготовления селективной среды. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Лаурилсульфатный бульон применяют для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в:

• пробах воды;
• сточных водах;
• молочных продуктах;
• других пищевых продуктах.

Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 11133:2014 с дополнением Amd:2018.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформные бактерии относят к семейству Enterobacteriaceae. Они способны расти в присутствии желчных солей и в течение 48 ч при 37 °C образовывать кислоту и газ из лактозы. Колиформные бактерии также определяют как представителей Enterobacteriaceae, способных расти при 37 °C и обычно обладающих β-галактозидазой.

Лаурилсульфатный бульон используют для обнаружения колиформных бактерий в воде, молочных и других пищевых продуктах. Среда также применяется для предварительного обнаружения колиформных бактерий в воде, стоках или сточных водах методом наиболее вероятного числа (НВЧ).

Среда разработана Mallmann и Darby. Введение лаурилсульфата натрия придаёт среде селективность в отношении колиформных бактерий. Газообразование в лаурилсульфатном бульоне используется не только как признак предварительной ферментации, но и как подтверждающий признак присутствия колиформных бактерий при рутинном исследовании воды. Лаурилсульфатный бульон также рекомендован комитетом ISO для обнаружения колиформных бактерий.

Среда предназначена для получения обильного роста и значительного количества газа при внесении небольших посевных доз колиформных микроорганизмов. Аэробные спорообразующие микроорганизмы в среде полностью подавляются.

Функции компонентов:

• триптоза обеспечивает необходимые для роста азотистые и углеродистые соединения, сульфаты и микроэлементы;
• фосфаты калия формируют буферную систему;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• лаурилсульфат натрия подавляет рост микроорганизмов, не относящихся к колиформным бактериям.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 35,60 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов соответствует ориентировочно 0,103 МПа.
5. Для посевной дозы 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
6. Для посевной дозы 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации либо пропорционально увеличьте концентрацию компонентов.

Методика обнаружения колиформных бактерий

1. После внесения пробы инкубируйте пробирки при 37 °C в течение 24–48 ч.
2. Для каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация (первичная ферментация), выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным бульоном.
3. Инкубируйте одну пробирку при 37 °C, вторую — при 44 °C.
4. Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, через 8–24 ч наблюдается ферментация, выполните индольную пробу добавлением реактива Ковача.
5. Положительная индольная проба в пробирке с бульоном, где при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.
6. Если в пробирке, инкубируемой при 37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, первичную ферментацию считают вызванной микроорганизмами, не относящимися к колиформным бактериям.

При хранении бульона при 2–8 °C среда может мутнеть; при комнатной температуре мутность исчезает. Для проведения стандартных процедур следует использовать соответствующие методические документы.

Тип образцов

• Пищевые и молочные продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с установленными руководствами.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов с учётом руководств и местных нормативных требований.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами. Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы предъявляют неодинаковые требования к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на среде.
• Каждая партия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Эффективность

Заявленные характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,56 % при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Селективность

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.