HiMedia M080-1KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M080-1KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный) в виде порошка с конечным pH 6,8 ± 0,2 при 25 °C. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; при посеве инокулята объёмом 10 мл и более требуется среда двойной концентрации или пропорционально усиленная среда.

Назначение

Лаурилсульфатный бульон применяют для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных продуктах и других пищевых образцах. Среда также используется для предварительного выявления колиформных бактерий в воде, стоках и сточных водах методом наиболее вероятного числа (НВЧ).

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11133:2014 и поправки Amd:2018. Среда рекомендована для обнаружения колиформных бактерий комитетом ISO и Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA).

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты и молочные образцы.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформные бактерии относятся к семейству Enterobacteriaceae. Представители этой группы способны расти в присутствии желчных солей и образовывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 ч при 37 °C. Колиформные бактерии также определяют как представителей Enterobacteriaceae, способных расти при 37 °C и обычно обладающих β-галактозидазой.

Лаурилсульфатный бульон предназначен для получения обильного роста и значительного количества газа при внесении небольшого инокулята колиформных бактерий. Аэробные спорообразующие микроорганизмы в этой среде полностью подавляются.

Функции компонентов среды:

• триптоза обеспечивает необходимые для роста вещества, включая соединения азота и углерода, сульфат и микроингредиенты;
• фосфаты калия образуют буферную систему;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• лаурилсульфат натрия подавляет рост микроорганизмов, не относящихся к колиформным бактериям.

Включение лаурилсульфата натрия делает среду селективной для колиформных бактерий. Лаурилсульфатный бульон был разработан Mallmann и Darby. Образование газа в среде служит не только предварительным, но и подтверждающим признаком присутствия колиформных бактерий при рутинном исследовании воды. Среда предназначена для выявления колиформных бактерий в воде, молочных продуктах и других пищевых продуктах.

После инокуляции пробирки инкубируют при 37 °C в течение 24–48 ч. Для каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация (первичная ферментация), выполняют пересев в две пробирки с лаурил-триптозным бульоном. Одну пробирку инкубируют при 37 °C, вторую — при 44 °C.

Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, через 8–24 ч наблюдается ферментация, выполняют реакцию на индол с добавлением реактива Ковача. Положительная реакция на индол в пробирке с бульоном, в которой при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.

Если в пробирке, инкубируемой при 37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, предполагается, что первичная ферментация была вызвана микроорганизмами, не относящимися к колиформным бактериям.

При хранении бульона при 2–8 °C возможно помутнение; при комнатной температуре бульон становится прозрачным.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,60 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки с перевёрнутыми трубками Дарема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для инокулята объёмом 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
6. Для инокулята объёмом 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации либо среду с пропорционально увеличенной концентрацией компонентов.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам и местным стандартам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,56 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Селективность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Обозначение реакции на индол относится к процедуре с добавлением реактива Ковача R008.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на среде.
• Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• Для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валид