HiMedia M080-10KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный)

Сухая питательная среда HiMedia M080-10KG Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный) для обнаружения и количественного определения бактерий группы кишечных палочек (колиформ). Применяется для анализа проб воды, сточных вод, молочных продуктов и других пищевых образцов; состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 11133:2014 и поправке Amd:2018.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для выделения представителей семейства Enterobacteriaceae, которые способны расти в присутствии солей желчных кислот и вырабатывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 часов при температуре 37 °C. Колиформы также определяются как члены семейства Enterobacteriaceae, способные расти при 37 °C и обычно обладающие β-галактозидазой.

В состав среды входит лаурилсульфат натрия, который делает бульон селективным для бактерий группы колиформ, подавляя рост других микроорганизмов, включая аэробные спорообразующие бактерии. Триптоза обеспечивает необходимые азот- и углеродсодержащие соединения, сульфаты и микроэлементы. Калийные фосфаты создают буферную систему, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Интерпретация результатов:

1. При наличии ферментации (первичная ферментация) в пробирке, инокулируют две дополнительные пробирки с лаурил-триптозным бульоном и инкубируют их при 37 °C и 44 °C соответственно.
2. Если в пробирке при 44 °C наблюдается ферментация через 8–24 часа, проводят тест на индол с использованием реагента Ковакса. Положительный тест на индол (красное кольцо) в сочетании с газообразованием при 44 °C указывает на присутствие Escherichia coli.
3. Если в пробирке при 37 °C через 24 часа ферментация отсутствует, первичная реакция считается вызванной организмами, не относящимися к колиформам.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 35,60 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить среду по пробиркам, в которые вставлены перевернутые трубки Дурхама (для сбора газа).
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.

Особенности инокуляции

• При объёме посева 1 мл и менее использовать среду одинарной концентрации.
• При объёме посева 10 мл и более готовить среду двойной концентрации или пропорционально увеличить количество компонентов.

Процедура анализа

1. Внести образец в среду.
2. Инкубировать пробирки при 37 °C в течение 24–48 часов.
3. При обнаружении газообразования и помутнения провести подтверждающие тесты (см. раздел «Принцип измерения»).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические свойства и контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор без осадка.
• Реакция: pH 6,60–7,00 (для 3,56% в/в водного раствора при 25 °C составляет 6,8 ± 0,2).
• Происхождение компонентов: животное.
• Форма выпуска: порошок.
• Тип упаковки: ПНД (HDPE).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 или 48 ± 2 часов.

Область применения и работа с образцами

Среда рекомендуется для анализа:

• Проб воды (питьевой, сточной, канализационной) методом наиболее вероятного числа (МПЧ/MPN).
• Образцов молочной продукции.
• Других пищевых продуктов.

При сборе и обработке проб следует руководствоваться соответствующими стандартами (APHA, ISO) и местными нормативными документами. Загрязненные материалы после использования должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения

1. Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователю рекомендуется валидировать среду для конкретных микроорганизмов, не указанных в COA, исходя из своих уникальных требований.