HiMedia M080-100G Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M080-100G Лаурилсульфатный бульон (лаурил-триптозный) — порошкообразный бульон для культивирования колиформных бактерий. HiMedia M080-100G применяют для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; для посевных объёмов 10 мл и более используют среду двойной концентрации или пропорционально увеличенное количество среды.

Назначение

Среда предназначена для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в:

• питьевой и другой воде;
• сточных водах, стоках и канализационных водах;
• молочных продуктах;
• пищевых образцах.

Лаурилсульфатный бульон также применяют для предварительного обнаружения колиформных бактерий в воде, стоках или канализационных водах методом наиболее вероятного числа.

Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям ISO 11133:2014 и поправки Amd:2018.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформные бактерии относятся к семейству Enterobacteriaceae. Эти микроорганизмы способны расти в присутствии желчных солей и образовывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 ч при 37 °C. Колиформные бактерии также определяют как представителей Enterobacteriaceae, способных расти при 37 °C и обычно обладающих β-галактозидазой.

Лаурилсульфатный бульон используют для обнаружения колиформных бактерий в воде, молочных и других пищевых продуктах. Среда может применяться для предварительного определения колиформных бактерий методом наиболее вероятного числа в воде, стоках и канализационных водах.

Среда разработана Mallmann и Darby. Добавление лаурилсульфата натрия придаёт среде селективность в отношении колиформных бактерий. Газообразование в лаурилсульфатном бульоне служит не только признаком предварительной ферментации, но и подтверждающим признаком присутствия колиформных бактерий при рутинном исследовании воды.

Лаурилсульфатный бульон предназначен для получения обильного роста и значительного количества газа даже при небольшом посевном объёме колиформных микроорганизмов. Аэробные спорообразующие микроорганизмы в этой среде полностью ингибируются.

Функции компонентов среды:

• триптоза обеспечивает необходимые для роста вещества, включая соединения азота и углерода, сульфат и микроингредиенты;
• фосфаты калия формируют буферную систему;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• лаурилсульфат натрия ингибирует микроорганизмы, отличные от колиформных бактерий.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 35,60 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дарема.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Для посевного объёма 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
6. Для посевного объёма 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации либо пропорционально увеличенное количество среды.
7. После инокуляции инкубируйте пробирки при 37 °C в течение 24–48 ч.
8. Из каждой пробирки, в которой выявлена ферментация, называемая первичной ферментацией, выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным бульоном.
9. Инкубируйте одну пробирку при 37 °C, а вторую — при 44 °C.
10. Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, через 8–24 ч выявлена ферментация, выполните индольную пробу, добавив реактив Ковача.
11. Положительная индольная проба в пробирке с бульоном, в которой при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.
12. Если в пробирке, инкубируемой при 37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, считают, что первичная ферментация была вызвана микроорганизмами, отличными от колиформных бактерий.

При хранении бульон может мутнеть при 2–8 °C, однако при комнатной температуре снова становится прозрачным.

Тип образцов

• Образцы пищевых продуктов и молочных продуктов.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Форма выпуска: порошок.
• Назначение изделия: бульон.
• Масса: 100 г.
• Происхождение: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: HDPE.
• Рабочая концентрация для приготовления: 3,56 % масс./об.
• Реакция водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 3,56 % масс./об. при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Значение pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Продуктивность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Селективность: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.