HiMedia M025S-500G Селенитный F бульон (Twin Pack)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M025S-500G Селенитный F бульон (Twin Pack) — порошковая селективная обогатительная среда для выделения Shigella из пищевых образцов. Применяется для селективного обогащения культур перед высевом на твёрдые среды; приготовленную среду запрещено автоклавировать.

Назначение и область применения

HiMedia M025S-500G используется как обогатительная среда для выделения Shigella из пищевых образцов, а также как селективная жидкая среда для культивирования видов Salmonella. Среда предназначена для лабораторного, диагностического, исследовательского применения и дальнейшего производства; не предназначена для использования человеком или животными, а также для терапевтических целей.

Среда применяется при исследовании образцов, в которых Salmonella может присутствовать в низкой концентрации или быть повреждена вследствие технологической обработки пищевых продуктов, включая воздействие низких температур, недостаточного нагревания, высушивания, радиации, консервантов и санитарных средств. Для восстановления таких микроорганизмов используют последовательность, включающую предварительное обогащение, селективное обогащение и селективный высев.

Производитель указывает соответствие применения рекомендациям Комитета BIS по спецификации IS 5887 (Part III)-1999.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M025S-500G
• Назначение изделия: бульон
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Комплектация среды: два компонента, Part A и Part B
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30

Состав

Содержание компонентов указано в граммах на литр.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита было впервые продемонстрировано Klett. Guth применил селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson исследовал селенит и разработал среду на его основе.

Жидкая селенит-цистиновая среда является модификацией формулы Leifson с добавлением цистина. Состав соответствует среде, рекомендованной AOAC для выявления Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах. Среда также рекомендуется APHA и USP; применение среды рекомендуется Комитетом ISO и BIS.

Селенит-цистиновый бульон применяется для выявления Salmonella при неострых стадиях заболеваний, когда микроорганизмы присутствуют в фекалиях в низком количестве, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения выявляемости небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Среда обеспечивает пролиферацию Salmonella и одновременно подавляет рост конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella. Обогащённый бульон после инкубации пересевают на твёрдую питательную среду.

Роль компонентов

• Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает азотистые питательные вещества.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает pH среды при восстановлении селенита бактериальными клетками и образовании щёлочи.
• Повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к чрезмерному росту других бактерий.
• Кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, помогает поддерживать нейтральный pH.
• Фосфат поддерживает стабильный pH и также снижает токсичность селенита.
• L-цистин действует как восстановитель и улучшает восстановление Salmonella.

Бульон не следует инкубировать дольше 24 ч: через 6–12 ч инкубации ингибирующее действие селенита снижается.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 4,0 г Part B в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,0 г Part A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагрейте смесь до полного растворения среды.
5. Разлейте приготовленную среду в стерильные пробирки.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке свободно проходящего пара в течение 30 мин.
7. Не автоклавируйте среду. Чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если восстановлено значительное количество селенита. Признак восстановления — красный осадок на дне пробирки или флакона.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте исследуемый пищевой образец в рекомендованный бульон для предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой селенит-цистиновой среды.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте посевы.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько селективных плотных сред:
   • бисмут-сульфитный агар M027;
   • агар с ксилозой, лизином и дезоксихолатом M031;
   • энтерический агар Хектоена M467;
   • агар МакКонки M081.

Контроль качества

Внешний вид Part A

Part A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Внешний вид Part B

Part B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор готовой среды светло-жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция среды определена для состава из 1,9 % масс./об. Part A и 0,4 % масс./об. Part B при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на агар МакКонки M081.