HiMedia M025S-100G Селенитный F бульон (Twin Pack)

Питательная селективная среда HiMedia M025S-100G Селенитный F бульон (Twin Pack) — двухкомпонентный порошковый бульон для обогащения культур при выделении Shigella из пищевых продуктов. HiMedia M025S-100G применяют перед посевом на селективные плотные среды; приготовленную среду нельзя стерилизовать в автоклаве, а натрий кислый селенит является высокотоксичным и коррозионно-активным веществом.

Назначение

Селенитный F бульон используется как селективная среда обогащения для выделения Shigella из пищевых образцов. Среда также применяется для селективного обогащения при выявлении и культивировании видов Salmonella в пищевых продуктах, клинических образцах и при эпидемиологических исследованиях.

Продукт поставляется в виде двух компонентов:

• часть A — основа среды;
• часть B — натрий кислый селенит.

Применение среды рекомендовано комитетом BIS в соответствии с требованиями IS 5887 (часть III), 1999.

Состав

Состав компонентов на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита впервые продемонстрировал Klett. Guth использовал селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson исследовал селенит и разработал среду на его основе.

Жидкая селенит-цистиновая среда является модификацией формулы Leifson с добавлением цистина. Формула соответствует составу, рекомендованному AOAC для выявления Salmonella в пищевых продуктах, особенно в продуктах из яиц. Среда также рекомендована APHA, USP, комитетом ISO и BIS.

Селенит-цистиновый бульон применяется для выявления Salmonella на неострых стадиях заболевания, когда количество микроорганизмов в фекалиях невелико, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения вероятности обнаружения небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Клетки Salmonella могут быть повреждены при различных операциях обработки пищевых продуктов, включая воздействие низких температур, недостаточного нагревания, высушивания, излучения, консервантов и санитарных средств. При низком количестве или повреждённом состоянии Salmonella выделение из пищевых образцов проводят последовательно: предварительное обогащение, селективное обогащение и селективный посев. Жидкая селенит-цистиновая среда используется как селективная среда обогащения для культивирования видов Salmonella и обеспечивает их размножение при подавлении роста конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella.

Ферментативный гидролизат казеина поставляет азотистые соединения. Лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает значение pH среды, поскольку при восстановлении селенита в результате роста бактерий образуется щёлочь. Повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к избыточному росту других бактерий. Кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, поддерживает нейтральное значение pH. Фосфат стабилизирует pH и также снижает токсичность селенита. L-цистин является восстановителем и улучшает восстановление Salmonella.

После обогащения бульон пересевают на плотную среду. Бульон нельзя инкубировать более 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 4,0 г части B и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,0 г части A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Подогрейте смесь до полного растворения среды.
5. Распределите приготовленную среду по стерильным пробиркам.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или текучим паром в течение 30 мин.
7. Не стерилизуйте среду в автоклаве. Избыточный нагрев ухудшает свойства среды.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если восстановилось значительное количество селенита. Признак восстановления — красный осадок на дне пробирки или флакона.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте пищевой образец в рекомендованный бульон предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой селенит-цистиновой среды.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте посевы.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько селективных плотных сред:
   • бисмут-сульфитный агар M027;
   • ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031;
   • агар Хектоэна M467;
   • агар МакКонки M081.

Меры безопасности

Натрий гидроселенит, также называемый натрий биселенитом, является очень токсичным, коррозионно-активным и тератогенным веществом.

При работе необходимо:

• обращаться с компонентом с особой осторожностью;
• избегать контакта с кожей;
• при попадании на кожу немедленно промыть поражённый участок большим количеством воды.

Приготовленная среда предназначена только для лабораторного, диагностического, исследовательского или дальнейшего производственного применения, если иное не указано в документации. Среда не предназначена для применения у людей или животных и не используется в терапевтических целях. Пригодность продукта для конкретной методики и образца должна быть проверена пользователем до начала работ.

Контроль качества

Внешний вид части A

Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Внешний вид части B

Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор полной среды светло-жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция среды определяется для состава из 1,9 % масс./об. части A и 0,4 % масс./об. части B при 25 °C.

• pH: 7,1 ± 0,2

Диапазон pH

• Диапазон pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на агар МакКонки M081.