HiMedia LQ273CCL-5X225ML Буферный обогатительный бульон для листерий (5×225 мл)

Питательная среда HiMedia LQ273CCL-5X225ML Буферный обогатительный бульон для листерий (5×225 мл) производства HiMedia — готовый к применению бульон в стеклянном флаконе объёмом 225 мл. Применяется для обогащения пищевых и молочных проб перед выделением Listeria monocytogenes; конечное значение pH среды составляет 7,3 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Буферный обогатительный бульон для листерий предназначен для процедуры обогащения при выделении Listeria monocytogenes из пищевых и молочных проб. Методика обогащения рекомендована Комитетом FDA и APHA для селективного обогащения L. monocytogenes.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам среды.

Методика проведения обогащения

1. Промаркируйте готовый к применению флакон LQ273CCL.
2. Внесите образец в количестве, соответствующем посевной дозе 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при заданной температуре в течение установленного времени.

Процедура обогащения для выделения L. monocytogenes из молочных продуктов

1. Инокулируйте исследуемую пробу в обогатительный бульон.
2. Инкубируйте при 30 °C в течение 4 ч без селективной добавки.
3. Через 4 ч добавьте селективную добавку.
4. Продолжайте инкубацию ещё 44 ч при 30 °C.
5. Через 24 и 48 ч после начала инкубации пересейте обогащённую культуру штриховым посевом на Оксфордскую основу среды для листерий (M1145) и агар LPM либо на агар для идентификации листерий PALCAM (M1064).
6. Инкубируйте посевы при 35 °C в течение 24–48 ч.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — единственный вид рода Listeria, вызывающий листериоз у человека; при этом L. seeligeri, L. welshimeri и L. ivanovii в отдельных случаях также связывали с заболеваниями человека. Микробиологические и эпидемиологические данные по спорадическим и эпидемическим случаям листериоза показывают, что основным путём передачи является употребление пищевых продуктов, контаминированных L. monocytogenes.

L. monocytogenes — документально подтверждённый возбудитель пищевых инфекций, представляющий опасность из-за высокой заболеваемости при инфицировании животных и человека, а также психротрофных свойств, обеспечивающих высокую устойчивость к нагреванию, охлаждению и высушиванию. Микроорганизм выделяли на промышленных молочных и других пищевых предприятиях. Listeria широко распространены в природе и встречаются в необработанных пищевых продуктах, почве, сточных водах, силосе и речной воде.

Виды Listeria растут в диапазоне pH 4,4–9,6 и сохраняются в пищевых продуктах со значениями pH за пределами этого диапазона. Виды Listeria являются микроаэрофильными, грамположительными, неспорообразующими, неинкапсулированными, неветвящимися короткими прямыми подвижными палочками. Наиболее выраженная подвижность наблюдается при 20 °C.

Пищевые образцы часто контаминированы микроорганизмами, отличными от Listeria, что затрудняет выделение листерий. Для выделения небольшого количества L. monocytogenes из пищевых проб требуется первоначальное обогащение. Обогатительный бульон для листерий был модифицирован за счёт увеличения буферной ёмкости, что позволяет использовать среду совместно с ДНК-зондом и другими методами, более чувствительными по сравнению с традиционным культивированием.

Триптон и соевый пептон обеспечивают аминокислотами и другими сложными азотсодержащими веществами. Декстроза служит источником энергии. Пируват натрия способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов. Фосфаты обеспечивают буферную ёмкость среды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B.

Селективность среды обусловлена присутствием антимикробных компонентов. Циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов. Налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов, а акрифлавин ограничивает рост грамположительных микроорганизмов.

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Молочные продукты.

Отбор и обработка образцов

Предположительно содержащие Listeria колонии отбирают и дополнительно очищают на триптон-соево-дрожжевом агаре (M1214). Очищенные изоляты подвергают комплексу биохимических тестов для подтверждения присутствия L. monocytogenes.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение установленного срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный буферный обогатительный бульон для листерий в стеклянном флаконе.

Цвет

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор жёлтого цвета с лёгкой флуоресценцией и небольшим осадком.

Объём среды

225 мл среды в стеклянном флаконе.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип изделия: бульон
• Назначение: обогащение образцов