HiMedia LQ083-25X5ML Нитратный бульон (25×5 мл)

Стерильная готовая питательная среда HiMedia LQ083-25X5ML Нитратный бульон (25×5 мл) производства HiMedia для выявления восстановления нитрата бактериями; объём каждой бутылки составляет 5 мл. Применяется для исследования изолированных микроорганизмов из клинических и неклинических образцов, при этом тест на восстановление нитрата не является подтверждающим и требует дополнительных морфологических, окрашивающих, биохимических и серологических исследований.

Назначение

Стерильная готовая к применению среда предназначена для выявления восстановления нитрата бактериями.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Пептон HM B # эквивалентен мясному экстракту.

Принцип анализа

Нитратный бульон приготовлен в соответствии с формулой, опубликованной в труде «Исследование чистых культур бактерий» Общества американских бактериологов.

Способность восстанавливать нитрат используется для дифференциации и идентификации различных типов бактерий, особенно представителей семейства Enterobacteriaceae. Неферментирующие и другие грамотрицательные палочки различаются по способности восстанавливать нитраты. Некоторые представители этой группы способны к денитрификации — восстановлению нитрата до газообразного азота. Для грамотрицательных палочек, ферментирующих глюкозу, образование газообразного азота из нитрата является важным дифференциальным признаком.

Нитрат калия в составе среды служит субстратом для определения восстановления нитрата бактериями. Некоторые бактерии преобразуют нитрат в нитрит, аммиак или газообразный азот.

Наличие нитритов выявляют добавлением по 0,5 мл раствора сульфаниловой кислоты R015 и раствора α-нафтиламина R009. Появление красно-фиолетовой окраски, обусловленное образованием красного диазокрасителя — п-сульфобензол-азо-α-нафтиламина, указывает на восстановление нитрата до нитрита.

Если окраска не появляется, это означает, что нитрат либо не восстановлен, либо восстановлен дальше — до аммиака или газообразного азота. Результат проверяют добавлением небольшого количества цинковой пыли в пробирку. Цинк восстанавливает нитрат до нитрита, что приводит к появлению красной окраски:

• появление красной окраски указывает, что нитрат присутствует в среде и ранее не был восстановлен;
• отсутствие красной окраски после добавления цинковой пыли указывает на отсутствие нитрата, то есть на его восстановление до соединений, находящихся дальше нитрита в цепи восстановления.

Таким образом, восстановление нитрата подтверждается либо наличием конечного продукта катаболизма, либо отсутствием нитрата в среде.

Представители семейства Enterobacteriaceae обычно восстанавливают нитрат до нитрита. Нитрит реагирует с сульфаниловой кислотой и N,N-диметил-1-нафтиламином с образованием красной окраски. Такая реакция называется реакцией Грисса.

Если микроорганизм быстро растёт и активно восстанавливает нитрат, тест следует проводить после раннего периода инкубации, поскольку нитрит может быть восстановлен далее до газообразного азота.

Методика проведения анализа

1. Промаркируйте готовую к применению бутылку LQ083.
2. Инокулируйте среду образцом в количестве 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при заданных температуре и времени.
4. Для проведения теста добавьте в пробирку с исследуемой культурой несколько капель раствора сульфаниловой кислоты R015 и раствора α-нафтиламина R009.
5. Появление отчётливой красной или розовой окраски указывает на восстановление нитрата.
6. Одновременно исследуйте контрольную неинокулированную пробирку.
7. Если розовая окраска не образуется, добавьте небольшое количество цинковой пыли для подтверждения отсутствия нитрата в среде.

Исследуемый материал

Тип образца: изолированные микроорганизмы из клинических и неклинических образцов.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильный прозрачный нитратный бульон во флаконах.

Цвет

Раствор светло-янтарного цвета.

Количество среды

5 мл среды во флаконе.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

pH

6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее данный микроорганизм назывался Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: бульон
• Форма поставки: готовая стерильная питательная среда
• Объём: 5 мл
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Контролируемый показатель: восстановление нитрата бактериями

Хранение и срок годности

Хранить при температуре 15–30 °C с момента получения. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Эффективность среды обеспечивается при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

В локальной карточке товара для хранения при получении указана температура 15–25 °C.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Восстановление нитрата не является подтверждающим тестом. Полная идентификация бактерий должна включать исследование морфологии, окраски по Граму, биохимические и серологические тесты. Добавление избыточного количества цинка может привести к ложноотрицательной реакции. При проведении теста на восстановление нитрата с α-нафтиламином окраска, возникающая при положительной реакции, может быстро исчезать.
2. Нитратный тест обладает высокой чувствительностью. Неинокулированный нитратный контроль следует исследовать с реагентами, чтобы определить, не содержит ли среда нитритов.

Оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.