Готовая стерильная питательная среда HiMedia LQ083-25X5ML нитратный бульон (25×5 мл) для определения способности бактерий восстанавливать нитраты. Применяется для дифференциации и идентификации различных типов бактерий, в частности семейства Enterobacteriaceae; объем одной единицы 5 мл.

Принцип измерения

Нитратный бульон предназначен для определения способности микроорганизмов восстанавливать нитраты. Нитрат калия в составе среды служит субстратом. Некоторые бактерии восстанавливают нитрат до нитрита, аммиака или газообразного азота.

Присутствие нитритов определяется путем добавления сульфаниловой кислоты и раствора $\alpha$-нафтиламина. Образование красно-фиолетового окрашивания (реакция Грисса) свидетельствует о восстановлении нитрата до нитрита. Если окрашивание отсутствует, это означает, что нитрат либо не восстанавливался, либо был восстановлен далее до аммиака или азота. Для подтверждения последнего добавляют цинковую пыль: цинк восстанавливает остаточный нитрат до нитрита, вызывая красное окрашивание. Отсутствие красного цвета после добавления цинка подтверждает полное восстановление нитрата.

Методика проведения анализа

1. Маркируйте флакон с готовой средой LQ083.
2. Инокулируйте пробу в количестве 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при заданной температуре и в течение указанного времени.
4. В пробирку с исследуемой культурой добавьте по несколько капель каждого реагента: сульфаниловой кислоты (R015) и раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).
5. Появление отчетливого красного или розового цвета указывает на восстановление нитрата.
6. Обязательно протестируйте контрольную (неинокулированную) пробирку.
7. При отсутствии розового цвета добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения отсутствия нитрата в среде.

Технические характеристики

• Назначение: определение восстановления нитратов бактериями
• Объем одной единицы: 5 мл
• Количество в упаковке: 25 флаконов
• Внешний вид: стерильный прозрачный раствор
• Цвет: светло-янтарный
• pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2 (диапазон контроля 6,80–7,20)

Состав

Состав, г/л:

Эквивалент мясного экстракта.

** Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ключ: (*) соответствующие номера WDCM; (#) ранее именовался как Enterobacter aerogenes.

Область применения и ограничения

Среда используется для анализа изолированных микроорганизмов из клинических и неклинических образцов.

Ограничения метода

• Восстановление нитратов не является подтверждающим тестом; полная идентификация должна включать морфологический, грам-отрицательный, биохимический и серологический анализы.
• Избыток цинковой пыли может привести к ложноотрицательному результату.
• При использовании $\alpha$-нафтиламина цвет положительной реакции может быстро блекнуть.
• Тест обладает высокой чувствительностью; необходимо проверять неинокулированный контроль на отсутствие нитритов в среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 15–25 °C (допустимо до 30 °C).
• Требования к безопасности: только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: использованные препараты подлежат автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными правилами по обращению с инфекционными материалами.