Стерильная готовая к применению питательная среда HiMedia LQ015-25X5ML Декарбоксилазный бульон Мёллера (25×5 мл) для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-орнитина гидрохлорид. Среда применяется для идентификации грамотрицательных кишечных палочек; объём готовой среды во флаконе составляет 5 мл, рекомендуемая температура хранения — 2–8 °C.

Назначение

Стерильная готовая к применению среда предназначена для дифференциации бактерий на основании их способности декарбоксилировать L-орнитина гидрохлорид.

Тип образца: выделенные микроорганизмы из клинических и не клинических образцов.

Состав

Состав, г/л:

* Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

HM-пептон B эквивалентен мясному экстракту.

Методика применения

1. Промаркируйте флакон с готовой к применению средой LQ015.
2. Внесите образец в количестве 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при установленной температуре в течение установленного времени.
4. Для проведения теста инокулированные пробирки необходимо защитить от воздуха слоем стерильного минерального масла.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Каждый исследуемый изолят также следует инокулировать в пробирку с базовой средой без аминокислоты. После инкубации в декарбоксилазном тесте могут образоваться два слоя среды разного цвета — жёлтого и фиолетового. Перед интерпретацией результатов осторожно встряхните пробирку.

Принцип действия и интерпретация результатов

Декарбоксилазный бульон Мёллера с гидрохлоридом орнитина применяют для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать L-орнитина гидрохлорид.

Декарбоксилазный бульон был введён Мёллером для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдигидролазы. До работ Мёллера бактериальные декарбоксилазы аминокислот изучались Gale и Gale с Epps.

Продукция орнитиндекарбоксилазы является полезным критерием при дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter. Бактерии рода Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как бактерии рода Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans. Декарбоксилазные среды также рекомендованы стандартными методами идентификации бактерий.

HM-пептон B и пептон обеспечивают среду азотистыми питательными веществами, необходимыми для роста бактерий. Декстроза является сбраживаемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный служат индикаторами pH.

При инокуляции среды бактериями, сбраживающими декстрозу, pH снижается из-за образования кислот, вследствие чего цвет индикатора изменяется с фиолетового на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазу. В результате декарбоксилирования орнитина образуется путресцин. Образование амина путресцина повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на фиолетовый.

Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и приобретает жёлтый цвет.

Технические характеристики

• Тип изделия: бульон.
• Форма выпуска: стерильная готовая к применению среда.
• Объём среды: 5 мл во флаконе.
• Определяемая ферментативная активность: декарбоксилирование L-орнитина гидрохлорида.
• Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2.
• Диапазон pH при контроле качества: 5,80–6,20.
• Внешний вид: стерильный прозрачный декарбоксилазный бульон Мёллера с гидрохлоридом орнитина во флаконах.
• Цвет: прозрачный раствор от светло-коричневого до серовато-фиолетового и светло-фиолетового.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.
• Температура хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики: гарантируются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления слоя стерильного минерального масла и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Ранее известен как Proteus vulgaris.

Ограничения применения

1. Инокулированные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание поверхности среды, что делает результат теста недействительным.
2. Для подтверждения необходимо провести другие биохимические тесты.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильный прозрачный декарбоксилазный бульон Мёллера с гидрохлоридом орнитина во флаконах.
• Цвет: прозрачный раствор от светло-коричневого до серовато-фиолетового и светло-фиолетового.
• Количество среды: 5 мл во флаконе.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.
• pH: 5,80–6,20.

Условия безопасности и обращения

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения.

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории. При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Стерилизация и утилизация

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Хранение

При получении хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики среды сохраняются при применении в пределах установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.