HiMedia GMV070-500G Буферный глюкозный HiVeg бульон (глюкозо-фосфатный)

Буферный глюкозный HiVeg бульон (глюкозо-фосфатный) HiMedia GMV070-500G на растительной основе. Применяется для биохимической идентификации бактериальных видов, в частности для проведения тестов на метиловый красный (MR) и Фогеса-Проскауэра (VP); вес упаковки 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон приготовлен с использованием растительных пептонов вместо животных, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Среда предназначена для дифференциации членов группы coli-aerogenes на основе анализа продуктов распада углеводов при метаболизме глюкозы.

Все представители семейства Enterobacteriaceae являются ферментаторами глюкозы. После 18–24 часов инкубации в процессе ферментации образуются кислые метаболиты, что дает положительную MR-реакцию у всех энтеробактерий. Однако при более длительной инкубации (от 2 до 5 суток):

• MR-положительные организмы продолжают вырабатывать кислоты, что приводит к снижению pH до 4,2 или ниже, преодолевая действие фосфатной буферной системы.
• MR-отрицательные организмы метаболизируют продукты первичной ферментации путем декарбоксилирования с образованием нейтрального ацетилметилкарбинола (ацетоина), что снижает кислотность и поднимает pH до 6,0 и выше.

При наличии атмосферного кислорода и щелочи нейтральные конечные продукты (ацетоин и 2,3-бутандиол) окисляются до диацетила, который в реакции с креатином дает красный цвет (положительный VP-тест).

Методика проведения анализа

Тест на метиловый красный (MR)

Инкубация культур проводится при температуре 30 °C в течение 5 суток.

Тест Фогеса-Проскауэра (VP)

Инкубация культур проводится при температуре 30 °C в течение 24–48 часов. Для выполнения теста применяются следующие методики:

1. Метод Веркмана: к 50 мл культуры добавить 2 капли 2 % раствора хлорида железа (III) и 5 мл 10 % раствора гидроксида натрия. Перемешать. Появление устойчивого медного окрашивания через несколько минут свидетельствует о положительной реакции.
2. Метод О'Миры: к 5 мл культуры добавить 25 мг твердого креатина, затем 5 мл концентрированного (40 %) раствора гидроксида натрия. Появление красного цвета через несколько минут после перемешивания свидетельствует о положительной реакции.
3. Модифицированный метод Левина, Эпштейна и Воуна: использование креатина, растворенного в концентрированном растворе гидроксида калия.
4. Метод Барритта: к 5 мл культуры добавить 1 мл реагента Барритта B (40 % гидроксид калия) и 3 мл реагента Барритта A (5 % $\alpha$-нафтол в абсолютном этаноле). Положительный результат — появление розового цвета (эозина) в течение 2–5 минут.

Примечание: Если известный ацетоин-положительный организм не дает реакции, рекомендуется осторожно нагреть культуру с реагентами VP.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 17 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам по 10 мл (или в ином объеме по требованию).
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Внешний вид: гранулированная среда от кремового до желтого цвета
• Вид готовой среды: светло-желтый прозрачный раствор
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Реакция 1,7 % водного раствора при 25 °C: pH 6,9 $\pm$ 0,2

Дополнительные спецификации

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 30 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.