Селективная обогащающая питательная среда HiMedia GMH287-500G Обогатительный бульон для энтеробактерий Моссель, гранулированная форма, с рекомендуемой температурой хранения 10–30 °C. HiMedia GMH287-500G предназначен для селективного обогащения Enterobacteriaceae при микробиологическом контроле фармацевтических образцов; среда чувствительна к перегреву и не подлежит автоклавированию при приготовлении.

Назначение

HiMedia GMH287-500G — обогатительный бульон для селективного выделения представителей семейства Enterobacteriaceae из фармацевтических продуктов при проведении испытаний на микробиологические пределы.

Среда EE Broth Mossel, также обозначаемая как MH287, применяется в сочетании с агаром с глюкозой, желчными солями и фиолетовым красным (MH581) для последующего выделения и подтверждения энтеробактерий.

Тип образца

Фармацевтические образцы.

Область применения

Среда предназначена для:

• селективного обогащения Enterobacteriaceae в фармацевтических образцах;
• микробиологического контроля фармацевтической продукции;
• выявления желчеустойчивых грамотрицательных бактерий;
• последующего выделения типичных колоний на агаре MH581;
• биохимического подтверждения выделенных микроорганизмов по окислительным и ферментационным реакциям.

Методика приготовления среды соответствует гармонизированной методологии микробиологических испытаний USP/EP/BP/JP/IP.

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды:

Панкреатический перевар желатина.

Обозначения компонентов

Обезвоженная бычья желчь.

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Принцип действия и интерпретация

Семейство Enterobacteriaceae включает Salmonella, Shigella и другие кишечные патогены. Эти микроорганизмы могут попадать в пищевую систему через воду, загрязнённую фекалиями. Большинство таких микроорганизмов может быть устранено при жёстких параметрах обработки пищевых продуктов, однако часть клеток может получить сублетальные повреждения из-за изменения pH, воздействия пара или нагревания и других неблагоприятных условий.

Поэтому при мониторинге пищевых продуктов важны выявление и количественный учёт повреждённых клеток после их ресусцитации. Бульон EE Mossel, разработанный Mossel и соавторами, рекомендован как обогатительная среда для желчеустойчивых грамотрицательных бактерий при биологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Пептонат желатина и моногидрат глюкозы обеспечивают рост большинства представителей Enterobacteriaceae. Бриллиантовый зелёный и обезвоженная желчь подавляют рост грамположительных бактерий. Фосфаты выполняют функцию буферной системы и нейтрализуют кислоты, образуемые лактозосбраживающими микроорганизмами, которые в противном случае могли бы отрицательно влиять на рост культуры.

Лактозоотрицательные, анаэрогенные лактозоположительные или поздно сбраживающие лактозу представители Enterobacteriaceae часто не выявляются стандартным тестом на коли-аэрогены. Для устранения этой проблемы в составе среды лактоза заменена глюкозой. Фосфаты образуют буферную систему среды.

Клетки, повреждённые в процессе высушивания или воздействием низкого pH, ресуспендируют в хорошо аэрируемом соево-казеиновом бульоне (MH011) в течение 2 ч при 25 °C перед обогащением в бульоне EE. Процедура ресусцитации рекомендована для высушенных пищевых продуктов, кормов для животных и полуконсервированных продуктов.

Бульон EE является обогатительной средой и должен использоваться совместно с агаром с глюкозой, желчными солями и фиолетовым красным (MH581). После первоначальной инкубации обогащённой пробы в бульоне EE при 30–35 °C в течение 24 ч петлю обогащённого материала пересевают на агар MH581. Типичные розовые колонии с MH581 пересевают для биохимического подтверждения по окислительным и ферментационным реакциям.

Десятичные разведения гомогената пищевого продукта используют при ожидаемом высоком содержании микроорганизмов; в остальных случаях применяют исходную суспензию.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,93 г сухой среды, что соответствует массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Разлейте приготовленную суспензию в пробирки или колбы в требуемом объёме.
3. Нагревайте среду в свободно циркулирующем паре или кипящей воде при 100 °C в течение 30 мин.
4. Немедленно охладите среду.
5. Не автоклавируйте среду.

Сбор и обработка образцов

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами USP/EP/BP/JP/IP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Для подтверждения необходимо выполнить дальнейшее выделение микроорганизмов.
• Не допускайте перегрева среды, поскольку среда чувствительна к воздействию высокой температуры.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтая или зеленовато-жёлтая гранулированная среда.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор изумрудно-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

pH

pH: 7,00–7,40.

Испытание на стимулирование роста

Стимулирование роста проводят в соответствии с гармонизированной методологией USP/EP/BP/JP/IP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени.

Свойства, стимулирующие рост

При заданной температуре и за период, не превышающий минимальное установленное время, при внесении ≤100 КОЕ должно наблюдаться явно видимое развитие микроорганизма, сопоставимое с результатом, ранее полученным для испытанной и одобренной партии среды.

Условия испытания: 30–35 °C, ≤24 ч.

Ингибирующие свойства

При заданной температуре и в течение периода не менее максимального установленного времени при внесении ≥100 КОЕ рост испытуемого микроорганизма отсутствует.

Условия испытания: 30–35 °C, ≥48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.