Питательная микробиологическая среда HiMedia GMH083-500G Бульон МакКонки в гранулированной форме предназначена для селективного обогащения Escherichia coli в фармацевтических образцах. Среда применяется при испытаниях на микробиологические пределы по гармонизированной методике и поставляется в упаковке массой 500 г.

Назначение

Среда предназначена для селективного обогащения Escherichia coli из фармацевтических образцов при испытаниях на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров рабочих характеристик.

* Панкреатический перевар желатина.
** Эквивалент обезвоженной бычьей желчи.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 34,51 г сухой среды, что соответствует массе среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки с перевёрнутыми трубками Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.

Принцип действия и интерпретация

Бульон МакКонки представляет собой модификацию среды МакКонки. Нейтральный красный обладает ингибирующим действием, поэтому в составе среды его заменили менее ингибирующим красителем — бромкрезоловым пурпурным. Бромкрезоловый пурпурный более чувствителен к изменениям pH среды.

Пептонат желатина обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста. Лактоза является ферментируемым углеводом. Обезвоженная желчь подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Бромкрезоловый пурпурный служит индикатором pH и приобретает жёлтую окраску в кислой среде.

Лактозоферментирующие микроорганизмы окрашивают среду в жёлтый цвет вследствие образования кислоты при ферментации лактозы. Изменение цвета индикатора наблюдается при снижении pH среды ниже 6,8. Лактозонеферментирующие микроорганизмы, включая Salmonella и Shigella, не изменяют внешний вид среды.

Методика анализа фармацевтических образцов

1. Перенесите гомогенат, содержащий 1 г или 1 мл исследуемого препарата, в 100 мл среды для переваривания соевого казеина (MH011), то есть в 100 мл бульона МакКонки.
2. Инкубируйте при 43–45 °C в течение 24–48 ч.
3. Для последующего выделения выполните пересев на агар МакКонки (MH081).
4. Рост красных, обычно немукоидных колоний, иногда окружённых зоной красноватого преципитата, указывает на присутствие колиформных бактерий.

Тип образца

Тип образца: фармацевтические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C
• pH приготовленной среды: 7,10–7,50
• Внешний вид: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета с зеленоватым оттенком
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор фиолетового цвета в пробирках

Контроль качества

Культуральные характеристики

Ростстимулирующие свойства проверяют в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Для микроорганизмов, не указанных в фармакопеях, культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

Характеристики культуры в таблице наблюдали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ростстимулирующие свойства

При инокуляции ≤100 КОЕ и инкубации при заданной температуре в течение периода, не превышающего минимальный установленный период, должен наблюдаться хорошо различимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и утверждённой партии среды. Указанные условия: 42–44 °C в течение ≤24 ч.

Ингибирующие свойства

При инокуляции ≥100 КОЕ и инкубации при заданной температуре в течение периода, не меньшего максимального установленного периода, рост тестируемого микроорганизма отсутствует. Указанные условия: 42–44 °C в течение ≥48 ч.

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при температуре 15–30 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности среды.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые варианты роста на среде.
2. Каждая партия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований применения.
3. Несмотря на рекомендацию среды для селективного выделения, для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические испытания.
4. Для последующего выделения требуется пересев на агар МакКонки (MH081).

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов продукта посредством автоклавирования и/или сжигания. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от классической среды МакКонки, в составе бульона МакКонки используется бромкрезоловый пурпурный вместо нейтрального красного; бромкрезоловый пурпурный изменяет цвет при снижении