Бульон Мюллера – Хинтона HiMedia GM391-500G (500 г)

Питательная среда бульон Мюллера – Хинтона HiMedia GM391-500G (500 г) в гранулированной форме. Рекомендуется для определения чувствительности бактериальных штаммов к антибактериальным агентам методами серийных разведений в бульоне.

Принцип измерения и интерпретация

Бульон Мюллера – Хинтона (MHB) представляет собой стабильную безсывороточную бактериологическую среду, которая поддерживает рост требовательных бактерий, таких как менингококки и гонококки. Современный состав дополнен катионами для улучшения восстановления Pseudomonas и культивирования большинства патогенных бактерий, встречающихся в клинической практике.

Среда является стандартизированной основой для определения минимальной подавляющей концентрации (МПК) антибиотиков методами разведения в бульоне или диффузии в агар. Соответствие стандартам Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) обеспечивает точность определения резистентных (R) и чувствительных (S) штаммов.

Роль компонентов

• Пептон HM B и Acicase® (кислотный гидролизат казеина): обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие необходимые питательные вещества.
• Крахмал: выполняет функцию защитного коллоида против токсических веществ, присутствующих в среде.
• Содержание тимина и тимидина: компоненты подобраны с низким содержанием этих веществ, что критично для определения МПК Enterococcus faecalis при использовании сульфаметоксазола-триметоприма (SXT).

Требования к катионам

Для метода серийных разведений CLSI рекомендует следующие уровни катионов:

• Ca²⁺: 20–25 мг/л
• Mg²⁺: 10–12,5 мг/л

Поскольку уровень катионов в базовой среде может быть недостаточным, при расчёте добавок следует учитывать уже имеющуюся концентрацию. Для корректировки рекомендуются следующие стоковые растворы:

• MgCl₂·6H₂O: 8,36 г на 100 мл (содержит 10 мг Mg²⁺/мл).
• CaCl₂·2H₂O: 3,68 г на 100 мл (содержит 10 мг Ca²⁺/мл).
• Альтернативно может быть использован бульон Мюллера – Хинтона № 2 с контролируемым содержанием катионов (M1657).

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и стерилизации

1. Суспендируйте 21,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.

Примечание: Рекомендуется прокипятить среду перед автоклавированием, чтобы избежать осаждения крахмала на дне сосудов.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный гранулированный порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный раствор.
• Реакция: pH 7,20–7,40 (для 2,1% в/в водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,1).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для работы с изолированными микроорганизмами (чистыми культурами).

Ограничения

• Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Среда рекомендуется только для тестирования чистых культур.
• Результаты in vitro могут не совпадать с результатами in vivo.
• Значение pH влияет на чувствительность к аминогликозидам, тетрациклинам и хинолонам.
• Содержание Ca²⁺ и Mg²⁺ влияет на активность аминогликозидов и тетрациклинов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.

Утилизация: все загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами.