Питательная микробиологическая среда Бульон Мюллера – Хинтона HiMedia GM391-500G (500 г) — гранулированный бактериологический бульон для лабораторного приготовления питательной среды. Бульон применяется для определения чувствительности бактериальных штаммов к антибактериальным препаратам методом разведения и предназначен только для чистых культур.

Назначение и область применения

Бульон Мюллера – Хинтона используется для определения чувствительности бактериальных штаммов к антибактериальным препаратам методом разведения в бульоне. Результаты оценивают, в частности, по минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибактериального препарата.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Среда предназначена для тестирования чувствительности чистых культур. Валидация применения для микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), проводится пользователем с учётом конкретных требований исследования.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован для соответствия установленным рабочим характеристикам.

Эквивалент: настой из 300 г говядины.

Acicase® эквивалентен кислотному гидролизату казеина.

Эквивалент настою из говядины.

$ Эквивалент кислотному гидролизату казеина.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 21,0 г гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C и давлении 15 фунтов силы на кв. дюйм (примерно 0,103 МПа) в течение 15 мин.

Перед автоклавированием рекомендуется прокипятить среду, чтобы предотвратить оседание крахмала на дне.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Мюллера – Хинтона представляет собой стабильную бактериологическую среду без сыворотки, поддерживающую рост требовательных к условиям культивирования бактерий, включая менингококки и гонококки.

Дополнение среды катионами улучшает восстановление Pseudomonas и обеспечивает рост большинства патогенных бактерий, встречающихся в клинической практике. Бульон и агар Мюллера – Хинтона применяются для стандартизированных исследований методом разведения в бульоне и методом диффузии из диска при определении активности антибиотиков, чаще всего выражаемой через минимальную ингибирующую концентрацию (МИК).

Институт клинических и лабораторных стандартов (CLSI) рекомендует бульон Мюллера – Хинтона для рутинного определения чувствительности бактерий к антибиотикам и устанавливает обновляемые пороговые значения для классификации штаммов как устойчивых (R) или чувствительных (S).

HM-пептон B и Acicase® обеспечивают среду азотсодержащими соединениями, углеродом, серой и другими необходимыми питательными веществами. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде.

Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина, определяемым по значениям МИК для Enterococcus faecalis при применении комбинации сульфаметоксазол/триметоприм (SXT).

При проведении метода разведения в бульоне CLSI рекомендует следующие уровни катионов:

• кальций (Ca²⁺): 20–25 мг/л;
• магний (Mg²⁺): 10–12,5 мг/л.

Содержание катионов в среде обычно недостаточно для достижения требуемого уровня. При необходимости добавления Ca²⁺ или Mg²⁺ необходимо учитывать концентрацию катионов, уже присутствующих в бульоне, и рассчитывать дополнительное количество.

Для добавления катионов рекомендуются следующие маточные растворы:

• 8,36 г MgCl₂·6H₂O в 100 мл раствора содержат 10 мг Mg²⁺/мл;
• 3,68 г CaCl₂·2H₂O в 100 мл раствора содержат 10 мг Ca²⁺/мл.

В качестве альтернативы доступен бульон Мюллера – Хинтона № 2 с контролем катионов M1657, в котором содержание катионов скорректировано в соответствии со стандартными рекомендациями.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный гранулированный порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 2,1 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,1.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначение: * — соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на этой среде.
2. Каждая партия среды протестирована на