HiMedia GM287-500G EE бульон, Моссель

Питательная микробиологическая среда HiMedia GM287-500G EE бульон, Моссель — гранулированный обогащающий бульон для выделения представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда применяется для обогащения проб пищевых продуктов и кормов, включая выявление сублетально повреждённых клеток, и не подлежит автоклавированию.

Назначение и область применения

EE-бульон Мосселя предназначен для обогащения представителей семейства Enterobacteriaceae при микробиологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Среда используется для:

• выявления и последующего подсчёта сублетально повреждённых клеток Enterobacteriaceae после этапа восстановления;
• обогащения культур из высушенных пищевых продуктов, кормов для животных и полу консервированных продуктов;
• подготовки посевного материала для метода наиболее вероятного числа (MPN);
• последующего высева на дифференциальные и селективные питательные среды.

К семейству Enterobacteriaceae относятся Salmonella, Shigella и другие кишечные патогены. Эти микроорганизмы могут попадать в пищевые продукты через фекально загрязнённую воду. При жёстких режимах обработки пищевых продуктов большинство таких микроорганизмов может быть удалено, однако изменения pH, воздействие пара, нагревание и другие неблагоприятные условия способны вызывать сублетальное повреждение клеток. Поэтому контроль пищевых продуктов включает восстановление, идентификацию и подсчёт повреждённых клеток.

Принцип действия

Пептический перевар животной ткани и декстроза обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста большинства представителей Enterobacteriaceae. Очищенная бычья желчь и бриллиантовый зелёный подавляют рост грамположительных бактерий.

Вместо лактозы в среду введена декстроза. Это позволяет выявлять лактозонегативные, анаэрогенные лактозоположительные и поздно ферментирующие лактозу представители Enterobacteriaceae, которые могут быть пропущены при стандартном коли-аэрогенезном тесте. Фосфаты выполняют функцию буферной системы среды.

Повреждённые при высушивании или воздействии низкого pH клетки перед этапом обогащения в EE-бульоне восстанавливают в хорошо аэрируемом триптиказо-соевом бульоне (GM011/M011) в течение 2 ч при 25 °C.

Состав

Расход компонентов приведён в граммах на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 43,46 г сухой гранулированной среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Разлейте по 120 мл в колбы объёмом 250 мл или по 9 мл в пробирки.
3. Закройте ёмкости ватными пробками или неплотно прилегающими крышками.
4. Нагревайте среду в текучем паре или кипящей воде в течение 30 мин.
5. Не допускайте перегрева среды.
6. Не автоклавируйте приготовленную среду.

Методика проведения анализа

EE-бульон Мосселя является обогащающей средой и должен применяться совместно с агаром с фиолетово-красной желчью и глюкозой (GM581/M581).

1. Для восстановления повреждённых клеток внесите образец в хорошо аэрируемый триптиказо-соевый бульон (GM011/M011) и выдерживайте 2 ч при 25 °C. Этап восстановления рекомендован для высушенных пищевых продуктов, кормов для животных и полу консервированных продуктов.
2. После восстановления проведите обогащение в EE-бульоне.
3. Для выявления лактозонегативных или поздно ферментирующих лактозу микроорганизмов выполните пересев на дифференциальные среды:
   • агар МакКонки (GM081/M081);
   • дезоксихолат-цитратный агар (GM065/M065);
   • бриллиантово-зелёный агар (GM016A/M016).
4. Для постановки метода наиболее вероятного числа используйте пробирки, приготовленные с EE-бульоном.
5. После первичной инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч выполните петлевой высев из пробирок MPN на агар с фиолетово-красной желчью и глюкозой (GM581/M581).
6. Типичные розовые колонии, выросшие на GM581/M581, пересейте для биохимического подтверждения.
7. Проведите подтверждение с помощью оксидазной реакции и реакций ферментации.
8. При ожидаемом высоком содержании микроорганизмов используйте десятичные разведения гомогената пищевого продукта; при низком ожидаемом содержании применяйте исходную суспензию.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтая или зеленоватая гранулированная среда.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор изумрудно-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

Контроль pH

pH водного раствора с концентрацией 4,35 % масс./об. при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Температурный диапазон из исходной карточки: 10–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Концентрация для контроля pH: 4,35 % масс./об. водного раствора при 25 °C
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C
• Время инкубации при контроле культуральных характерист